莱氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 莱氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Theileria lestoquardi Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4625 |
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，试剂盒预混优化反应体系，无需额外配制。
高特异性：针对莱氏泰勒虫保守序列设计引物，经验证与近缘病原体无交叉反应。
高灵敏度：检测下限达数百拷贝/反应，线性范围覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。
防污染设计：一管式闭盖检测，避免扩增产物污染。
稳定性：-20℃保存有效期12个月，配套阳性对照确保结果可靠性。
包装组分
| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | -20℃避光 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | -20℃ |
| 莱氏泰勒虫引物混合物 | 100 μL（白盖） | -20℃ |
| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | -20℃ |
| 使用手册 | 1份 | 常温 |
注：需自备DNA模板及10×ROX校正染料（视机型需求）。
操作流程
1. 阳性对照稀释（梯度制备）
标记6管（7~2号），每管加45 μL稀释液。
7号管加入5 μL原液（10⁸拷贝/μL），涡旋混匀得10⁷拷贝/μL，依次稀释至10²拷贝/μL。
2. 样品处理
待测DNA模板建议浓度10~100 ng/μL，避免抑制剂污染。
3. PCR反应体系（20 μL/反应）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2×qPCR MagicMix | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| 模板DNA/阳性对照 | 2 |
| ROX（如需） | 0.4 |
| ddH₂O | 补至20 |
4. 扩增程序
预变性：95℃ 5分钟；
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）；
熔解曲线分析：60~95℃（可选）。
注意事项
阳性对照稀释需在独立区域操作，避免污染。
反应体系配制建议使用低吸附枪头，分装避免反复冻融。
熔解曲线单峰表明扩增特异性，多峰需排查污染或引物二聚体。
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