莱氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 莱氏泰勒虫染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Theileria lestoquardi Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4625 |
产品特点
即开即用:用户仅需提供待测DNA模板,试剂盒预混优化反应体系,无需额外配制。
高特异性:针对莱氏泰勒虫保守序列设计引物,经验证与近缘病原体无交叉反应。
高灵敏度:检测下限达数百拷贝/反应,线性范围覆盖5个数量级(10²~10⁷拷贝/μL)。
防污染设计:一管式闭盖检测,避免扩增产物污染。
稳定性:-20℃保存有效期12个月,配套阳性对照确保结果可靠性。
包装组分
| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL(棕色管) | -20℃避光 |
| 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL(黄盖) | -20℃ |
| 莱氏泰勒虫引物混合物 | 100 μL(白盖) | -20℃ |
| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50 μL(红盖) | -20℃ |
| 使用手册 | 1份 | 常温 |
注:需自备DNA模板及10×ROX校正染料(视机型需求)。
操作流程
1. 阳性对照稀释(梯度制备)
标记6管(7~2号),每管加45 μL稀释液。
7号管加入5 μL原液(10⁸拷贝/μL),涡旋混匀得10⁷拷贝/μL,依次稀释至10²拷贝/μL。
2. 样品处理
待测DNA模板建议浓度10~100 ng/μL,避免抑制剂污染。
3. PCR反应体系(20 μL/反应)
| 组分 | 体积(μL) |
| 2×qPCR MagicMix | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| 模板DNA/阳性对照 | 2 |
| ROX(如需) | 0.4 |
| ddH₂O | 补至20 |
4. 扩增程序
预变性:95℃ 5分钟;
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40循环,荧光采集);
熔解曲线分析:60~95℃(可选)。
注意事项
阳性对照稀释需在独立区域操作,避免污染。
反应体系配制建议使用低吸附枪头,分装避免反复冻融。
熔解曲线单峰表明扩增特异性,多峰需排查污染或引物二聚体。
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