本试剂盒基于PCR分子扩增原理,针对狄斯瓦螨特异性基因序列设计扩增体系,专门用于蜜蜂寄生狄斯瓦螨的核酸检测。狄斯瓦螨是蜜蜂养殖主要病虫害,破坏力极强,本试剂盒适配蜜蜂躯体、蜂箱巢脾样本检测,可实现螨害早期微量病原筛查,特异性强、检测快速,能够提前预判蜂群螨害风险,为蜜蜂养殖病虫害绿色防控、精准治理提供技术支撑。
产品名称
狄斯瓦螨PCR检测试剂盒
货号
YS-P014900
英文名称
Varroa destructorPCR
规格
50T
有效期
12个月
保存
-20℃保存
基础原理:
引物针对狄斯瓦螨特有线粒体基因序列设计,种属鉴别能力强。
从蜂体、蜂巢样本提取螨虫基因组 DNA 作为 PCR 扩增模板。
根据扩增产物结果,检测蜂群狄斯瓦螨寄生情况。
操作步骤:
1. 样本处理
提取待测样本RNA,建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释(示例:6个梯度)
标记离心管(7至2号),每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照,避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制(20μL/反应)
| 组分 | 体积(μL) |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录:50℃ 15分钟(可选,根据病毒RNA特性调整)。
预变性:95℃ 2分钟。
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号),共40循环。
注意事项:
1、实验分区管理
实验全程需严格划分三个独立区域:试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区,各区实验服、移液器及耗材严禁混用,防止交叉污染。
2、防止污染操作
使用带滤芯枪头,每步更换枪头;
阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行,避免污染其他试剂;
加样后立即盖紧管盖,避免气溶胶扩散。
3、试剂保存与使用
所有试剂需-20℃避光保存,避免反复冻融,确保稳定性;
使用前于冰上解冻并轻柔混匀,瞬时离心后使用。
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