本试剂盒针对雅氏瓦螨专属核酸保守序列开发PCR检测体系，可精准检测蜂类样本中的雅氏瓦螨病原。雅氏瓦螨寄生性强、传播速度快，严重影响蜂群繁育与生存，本试剂盒引物经过特异性优化，可精准区分雅氏瓦螨与其他蜂螨种类，检测灵敏度高、重复性好，操作简便，适用于蜂业养殖常态化检测、病虫害监测及蜂群健康筛查工作。
产品名称 | 雅氏瓦螨PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014901 |
英文名称 | Varroa jacobsoniPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
引物匹配雅氏瓦螨特异性遗传序列，不会扩增其他瓦螨核酸。
裂解螨虫样本并纯化 DNA，利用热循环仪完成靶标片段扩增。
借助特异性扩增片段判定样本是否存在雅氏瓦螨。
操作步骤：
DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA，确保无抑制剂残留。
标准曲线制备（样本制备区）
标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用带滤芯枪头）。
梯度稀释阳性对照：
7号管：加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照，震荡混匀，得1×10^7拷贝/μL标准品；
依次稀释至2号管，最终浓度跨5个数量级（1×10^7至1×10^3拷贝/μL）。
所有标准品置于冰上备用，避免反复冻融。
试剂配制（试剂准备区）
反应液避光解冻后涡旋混匀，短暂离心分装至PCR管。
每反应体系20 μL，含预混引物、荧光染料及缓冲液。
加样（样本处理区）
分别加入5 μL待测DNA或标准品至反应管，阴性对照以DEPC-H2O替代。
盖紧管盖，避免气泡干扰。
PCR扩增（核酸扩增区）
按以下程序运行定量PCR仪：
预变性：95℃ 2分钟；
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析（可选）。
注意事项：
所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰
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