产品名称:木丝霉PCR检测试剂盒
英文名称:Xylohypha bantaniaPCR
货号:YS-P014928
分类:PCR检测试剂盒
规格:50T/盒
检测原理:
引物结合木丝霉 ITS 内转录间隔区真菌专属序列,可精准识别该真菌核酸,不受其他霉菌干扰。
提取病样真菌基因组 DNA,利用 Taq 聚合酶扩增目标 ITS 片段,放大微量真菌核酸信号。
通过与试剂盒真菌阳性对照条带比对,完成木丝霉感染的核酸层面判定。
实验流程:
1. DNA提取(样本制备区)
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备(独立操作区)
标记6管为梯度稀释点(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释,混匀后作为标准品(避免污染)。
3. PCR反应体系配制(试剂配制区)
按以下比例配制(示例):
| 组分 | 体积(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置:预变性95℃ 3 min;40循环(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲线分析。
数据分析:根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
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注意事项:
所有试剂避免反复冻融,可分装小体积冻存;融化后冰上放置不超过 2 h,酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高,开盖全程在生物安全柜操作,防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶,枪头一次性使用;实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测,严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸,减少抑制剂干扰
关键字: 木丝霉;PCR检测试剂盒;
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