产品名称:牛病毒性腹泻病毒(BVDV)核酸检测试剂盒(RT-PCR)
英文名称:Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) Nucleic Acid Detection Kit (RT-PCR)
货号:YS-P015150
分类:PCR检测试剂盒
规格:50T/盒
检测原理:
提取牛血清病毒 RNA,反转录生成 cDNA,靶向 5’UTR 保守区荧光 RT-PCR 扩增病毒。
试剂盒引物匹配 BVDV 高度保守非编码区,微量病毒 RNA 即可检出扩增荧光。
RNA 模板经反转录后启动链式扩增,无病毒 RNA 则无 cDNA,无扩增产物。
实验流程:
1. 样本处理
提取待测样本RNA,建议使用商品化RNA提取试剂盒。
2. 阳性对照稀释(示例:6个梯度)
标记离心管(7至2号),每管加入45μL模板稀释液。
按10倍梯度稀释阳性对照,避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制(20μL/反应)
| 组分 | 体积(μL) |
| RT-PCR反应液 | 10 |
| 荧光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 补至20 |
4. 上机程序
逆转录:50℃ 15分钟(可选,根据病毒RNA特性调整)。
预变性:95℃ 2分钟。
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号),共40循环。
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注意事项:
避免反复冻融试剂,解冻后需充分混匀。
实验环境需严格分区(试剂准备区、样本处理区、扩增区),防止污染。
阳性对照需与样本分装操作。
本产品仅限科研用途,不可用于临床诊断。
操作时需穿戴防护装备,避免试剂接触皮肤或眼睛。
样本采集需遵循无菌原则,运输时使用干冰或冰袋保存。
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