产品名称:犬布氏杆菌PCR检测试剂盒
英文名称:Canine Brucella PCR Detection Kit
货号:YS-P015184
分类:PCR检测试剂盒
规格:50T/盒
检测原理:
提取犬全血、分泌物细菌基因组 DNA,引物靶向布氏杆菌保守 Omp 基因,普通 PCR 扩增后电泳条带定性检测菌体核酸。
实时荧光 PCR 体系,布氏杆菌特异性水解探针结合扩增子,扩增循环中荧光强度递增,定量判断犬体内布氏杆菌载量。
利用布氏杆菌特有插入序列 IS711 作为扩增靶标,该序列不存在于其他犬源致病菌,避免假阳性交叉反应。
实验流程:
RNA提取:使用配套试剂或商业试剂盒提取样品RNA。
反应配制:按说明书比例混合预混液、引物探针、模板RNA及对照。
PCR扩增:
预变性:95℃ 2分钟;
循环:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40个循环),于FAM通道采集信号。
结果分析:通过Ct值判定病毒含量,阳性对照需出现典型扩增曲线,阴性对照无信号。
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注意事项:
试剂盒含生物源性质粒模板,操作全程佩戴手套、口罩,阳性模板仅在生物安全柜开盖;
所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃;
试剂避免反复冻融,单次融化冰上放置不超过 2 h,使用完毕立即放回 - 20℃;
移液器吸头一次性使用,禁止重复吸取,防止交叉污染;
试剂盒仅用于科研检测,严禁人临床体外诊断;
扩增产物区产物不可带回试剂、提取区,防止气溶胶大面积污染实验室;
若阴性对照持续出现杂带,全部更换全新试剂盒,实验室台面、移液器紫外过夜消毒。
关键字: 犬布氏杆菌;PCR检测试剂盒;
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