产品名称：人FGFR G/A多态性检测试剂盒(PCR-RLFP)
英文名称：Human FGFR G/A Polymorphism Detection Kit (PCR-RFLP)
货号：YS-P015194
分类：PCR检测试剂盒
规格：50T/盒
检测原理：
PCR 扩增 FGFR 基因 G/A 突变区段，限制性内切酶仅切割 G 等位基因扩增产物，电泳条带区分 GG、GA、AA 三种基因型。
引物特异性结合 FGFR 保守侧翼序列，富集含 G/A 多态位点核酸，酶切后不同基因型产生长短不一核酸片段。
同步设置阴性、分型对照模板，消除 DNA 提取杂质、酶活性不足导致的分型失败，保证多态检测准确性。
实验流程：
1. DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备（独立操作区）
标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。
3. PCR反应体系配制（试剂配制区）
按以下比例配制（示例）：
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。
数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
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注意事项：
试剂盒含生物源性质粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，阳性模板仅在生物安全柜开盖；
所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃；
试剂避免反复冻融，单次融化冰上放置不超过 2 h，使用完毕立即放回 - 20℃；
移液器吸头一次性使用，禁止重复吸取，防止交叉污染；
试剂盒仅用于科研检测，严禁人临床体外诊断；
扩增产物区产物不可带回试剂、提取区，防止气溶胶大面积污染实验室；
若阴性对照持续出现杂带，全部更换全新试剂盒，实验室台面、移液器紫外过夜消毒。
关键字： 人FGFR G/A多态性;PCR检测试剂盒;
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