本试剂盒以玉米专属内源IVR基因为检测靶点,是玉米物种溯源与基质验证的专用核酸试剂,可定性检测各类粮食、食品、饲料、复合原料中的玉米源性成分。基因物种特异性极强,不会与水稻、大豆、小麦等其他作物基因交叉反应,主要用于样品基质确证、玉米原料溯源、转基因玉米检测的体系质控与成分验证。
产品名称 | 玉米内源基因IVR核酸检测试剂盒 | 货号 | YS-P015603 |
英文名称 | Maize Endogenous IVR Gene Nucleic Acid Detection Kit | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

以玉米物种固有IVR内源保守基因为靶标,设计特异性引物探针,通过实时荧光PCR扩增IVR基因核酸片段,用于验证样本中玉米核酸的有效性。
IVR基因是玉米专属稳定内源基因,在玉米基因组中稳定表达,不存在于其他作物中,可作为玉米样本核酸提取合格性的内参检测依据。
提取样本总核酸后,通过PCR特异性扩增玉米IVR内源基因,根据荧光扩增信号判定样本是否含有玉米源性核酸,同时校验检测实验有效性。
操作步骤:

DNA提取(样本制备区)
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA,确保无抑制剂残留。
标准曲线制备(样本制备区)
标记6支离心管为7至2号,每管加入45 μL DEPC-H2O(需使用带滤芯枪头)。
梯度稀释阳性对照:
7号管:加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照,震荡混匀,得1×10^7拷贝/μL标准品;
依次稀释至2号管,最终浓度跨5个数量级(1×10^7至1×10^3拷贝/μL)。
所有标准品置于冰上备用,避免反复冻融。
试剂配制(试剂准备区)
反应液避光解冻后涡旋混匀,短暂离心分装至PCR管。
每反应体系20 μL,含预混引物、荧光染料及缓冲液。
加样(样本处理区)
分别加入5 μL待测DNA或标准品至反应管,阴性对照以DEPC-H2O替代。
盖紧管盖,避免气泡干扰。
PCR扩增(核酸扩增区)
按以下程序运行定量PCR仪:
预变性:95℃ 2分钟;
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
熔解曲线分析(可选)。
注意事项:

试剂盒含生物源性质粒模板,操作全程佩戴手套、口罩,阳性模板仅在生物安全柜开盖;
所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃;
试剂避免反复冻融,单次融化冰上放置不超过 2 h,使用完毕立即放回 - 20℃;
移液器吸头一次性使用,禁止重复吸取,防止交叉污染;
试剂盒仅用于科研检测,严禁人临床体外诊断;
扩增产物区产物不可带回试剂、提取区,防止气溶胶大面积污染实验室;
若阴性对照持续出现杂带,全部更换全新试剂盒,实验室台面、移液器紫外过夜消毒。
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关键字: 玉米内源基因;IVR; 核酸检测试剂盒;
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