本试剂盒针对小反刍兽疫病毒研发双重检测体系,可同步识别小反刍兽疫通用型病毒核酸与疫苗株病毒核酸,精准区分自然感染与疫苗免疫后的核酸阳性反应,有效解决小反刍兽疫免疫监测与疫病排查难以区分的行业难题。产品主要应用于羊、牛等小反刍畜禽的免疫效果评估、常态化疫病筛查、养殖基地检疫验收等场景,检测特异性极高,不会与其他畜禽呼吸道疫病病毒发生交叉反应,能够快速甄别畜禽是自然野毒感染还是疫苗免疫所致阳性,为小反刍兽疫精准防控、免疫效果考核提供科学依据。
产品名称 | 小反刍兽疫通用型/疫苗株(PPR-U/ PPR-V)双重核酸检测试剂盒 | 货号 | YS-P015641 |
英文名称 | Universal Peste des Petits Ruminants Virus / Vaccine Strain (PPR-U/PPR-V) Duplex Nucleic Acid Detection Kit | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

双重荧光定量 RT-PCR 鉴别原理,通用型靶点为 PPRV 基因组保守区,疫苗株靶向疫苗基因缺失标记位点,依靠不同荧光信号区分野毒总群与疫苗免疫毒株。
硅柱膜吸附核酸纯化配套试剂盒裂解液,快速裂解羊鼻拭子、淋巴结组织中病毒颗粒,选择性吸附 RNA,去除饲草杂质、蛋白色素干扰。
梯度拷贝数质粒阳性对照校准体系,可根据 Ct 值实现病毒核酸载量半定量,辅助区分免疫带毒与野毒感染。
操作步骤:

1. DNA提取(样本制备区)
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备(独立操作区)
标记6管为梯度稀释点(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释,混匀后作为标准品(避免污染)。
3. PCR反应体系配制(试剂配制区)
按以下比例配制(示例):
| 组分 | 体积(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置:预变性95℃ 3 min;40循环(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲线分析。
数据分析:根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
注意事项:

所有试剂避免反复冻融,可分装小体积冻存;融化后冰上放置不超过 2 h,酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高,开盖全程在生物安全柜操作,防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶,枪头一次性使用;实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测,严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸,减少抑制剂干扰
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关键字: 小反刍兽疫通用型/疫苗株;PPR-U/ PPR-V)双重核酸检测试;核酸检测试剂盒;
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