本试剂盒专注于小反刍兽疫通用型毒株与野毒株的双重核酸检测，能够快速甄别小反刍畜禽是否感染致病性野毒，同时广谱覆盖通用型毒株变异类型。产品核心聚焦临床疫病排查与疫情风险筛查，可快速区分非致病相关通用型核酸与致病性野毒核酸，适用于基层畜牧疫病检测、养殖场日常防疫监测、畜禽出栏检疫等常规检测场景。操作简便、检测周期短，适配基层批量样本检测需求，可高效排查小反刍兽疫致病野毒感染隐患，及时发现潜在疫情，为小反刍兽疫疫病早防早控、阻断疫情传播提供基础检测保障。
产品名称 | 小反刍兽疫通用型和野毒株（PPR-U/ PPR-W）双重核酸检测试剂盒 | 货号 | YS-P015643 |
英文名称 | Universal Peste des Petits Ruminants Virus / Wild Strain (PPR-U/PPR-W) Duplex Nucleic Acid Detection Kit | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
双色荧光探针 RT-PCR 检测原理，通用探针识别所有 PPRV 毒株，野毒株探针仅结合野外流行株特有基因片段，双荧光信号结合判定是否存在野毒感染，排除疫苗干扰。
蛋白酶 K 快速裂解体系，常温快速破碎病毒包膜释放核酸，无需高温长时间水浴裂解，简化野外现场样本前处理流程。
阴阳性对照、临界对照三质控组合，阴性对照监控试剂污染，阳性对照验证扩增活性，临界对照划定最低检出限，杜绝弱阳性漏检。
操作步骤：
（一）反应体系配制（冰上操作，防酶失活与污染）
按 “水→缓冲液→dNTP→引物→模板→Taq 酶” 顺序加样（酶最后加，避免失活）。
轻轻涡旋混匀，短暂离心（3000rpm，10s），使液体沉至管底。
无热盖的 PCR 仪：加 1 滴矿物油覆盖液面，防止蒸发。
（二）PCR 程序设置（标准 35 循环）
预变性：94℃，3-5min（彻底变性模板 DNA）。
循环阶段（35 次）：
变性：94℃，30s（双链解链）。
退火：55-65℃，30s（引物结合模板，按引物 Tm 值调整）。
延伸：72℃，1min/kb（Taq 酶合成新链，1kb 片段约 1min）。
终延伸：72℃，5-10min（确保片段完整延伸）。
保温：4℃，∞（防止非特异性复性，短期保存）。
（三）产物检测（琼脂糖凝胶电泳）
制胶：1% 琼脂糖凝胶（1g 琼脂糖 + 100mL 1×TAE 缓冲液），加热融化后加核酸染料，倒胶插梳，凝固 30min。
上样：取 5μL PCR 产物 + 1μL 上样缓冲液，点样；同时加 DNA Marker（分子量对照）。
电泳：120V，20-30min，至溴酚蓝迁移至凝胶 2/3 处。
成像：凝胶成像系统观察条带，目标片段位置与预期一致则为阳性。
四、参数优化
退火温度（Tm）：引物 Tm 值 = 4×(G+C)+2×(A+T)，退火温度一般低于 Tm 值 5℃，温度过高无条带，过低非特异性条带多。
Mg²⁺浓度：1.5-2.5mM，浓度过低酶活性低、产量少；过高非特异性扩增增加。
循环数：25-35 个循环，少于 25 个产物不足，多于 35 个易出现非特异性条带。
延伸时间：按目标片段长度调整，≤1kb 用 1min，1-3kb 用 2-3min。
注意事项：
分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染
无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服
试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心
避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作
防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台
公司正在出售的产品：
马毛癣菌PCR检测试剂盒 | 鸭瘟病毒(DPV)PCR检测试剂盒(荧光-PCR法) | 柯萨奇病毒IgG检测试剂盒 Cox V-IgG ELISA Kit |
马疱疹病毒1型PCR检测试剂盒 | 大片吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗肌联蛋白抗体检测试剂盒 TTN ELISA Kit |
马皮疽组织胞浆菌PCR检测试剂盒 | 猫源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗染色体抗体检测试剂盒 anti-chromosome Ab ELISA Kit |
马腺疫链球菌PCR检测试剂盒 | 产气肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗组织转谷氨酰胺酶检测试剂盒 IgA ELISA Kit |
绵羊星状病毒通用PCR检测试剂盒 | 人附红细胞体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 可溶性间皮素相关肽检测试剂盒 SMRP ELISA Kit |
毛滴虫PCR检测试剂盒 | 马腺病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗乙型肝炎病毒e抗体检测试剂盒 HBeAb ELISA Kit |
梅克尔多元癌细胞病毒PCR检测试剂盒 | 鸡附红细胞体探针法荧光定量PCR试剂盒 | 小反刍兽疫通用型和野毒株（PPR-U/ PPR-W）双重核酸检测试剂盒可溶性CD28检测试剂盒 sCD28 ELISA Kit |
绵羊鞭虫PCR检测试剂盒 | 猫疱疹病毒1型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗糖蛋白抗体检测试剂盒 GP ELISA Kit |
猫瘟病毒(FPV)核酸检测试剂盒 | 埃希氏菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 抗天然脱氧核糖核酸抗体检测试剂盒 n-DNA-Ab ELISA Kit |
关键字： 小反刍兽疫通用型和野毒株;PPR-U/ PPR-W; 核酸检测试剂盒;
上海研生实业有限公司成立于2011年专业销售各种科学实验产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、等多个研究及应用领域。旗下有“上研生"品牌。
我们努力将欧美进口品牌的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视国内科研市场的产品开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。
同时国家对于生物行业的发展给予极大的重视，更多地侧重于科研的投入。公司的服务和业务在同行获得认可。也具备丰富的管理经验，同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想，更有责任感，是您科研道路上值得信赖的伙伴。
公司的理念是：以诚信为本，努力打造优质品牌，为您提供产品的售中、售后服务。