猪抗司美格鲁肽抗体(Semaglutide-IgG)ELISA试剂盒-定性
货号:LM8K681P
规格:48T/96T
种属:猪
适用范围: 本试剂盒仅用于科研, 不能用于临床诊断,适用于猪血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其它生物体液。
检测原理：试剂盒采用双抗原夹变法原理:将捕获抗原包被于酶标板上,加入样品;样品中的抗体被捕获,结合形成"抗原抗体"免疫复合物,清洗去除游离的杂质,"再加飞HRP'标记的酶标记的检测抗原,形成"抗原-抗体-酶标抗原"夹心复合物, 清洗去除多余的杂质,加入TMB显色,再加入终止液,用酶标仪在.450nm处测IOD值,颜色的深浅和样品中的待测抗原浓度呈正比。
产品组分：
| 名称 | 组成成分 | 数量（48T） | 数量（96T） |
| 酶标板 | 包被板 | 8×6条 | 8×12条 |
| 阳性对照 | 阳性对照 | 1支×0.5mL | 1支×1mL |
| 阴性对照 | 阴性对照 | 1支×0.5mL | 1支×1mL |
| 酶标记物 | HRP酶标记检测抗原 | 1支×6mL | 1支×12mL |
| 样品稀释液 | PBS 、BSA等 | 1支×6mL | 1支×12mL |
| 浓缩洗液（20×) | 20倍浓缩洗液 | 1支×15mL | 1支×25mL |
| 显色剂 | 过氧化氢、TMB等 | 1支×6mL | 1支×12mL |
| 终止液 | 稀硫酸 | 1支×3mL | 1支×6mL |
如需单独采购通用型组分，请提供对应的组分名称。
需要但未包含的实验材料：
· 蒸馏水或去离子水，一次性离心管、一次性手套等耗材；
· 移液器、多通道移液器及配套枪头；
· 烧杯、量筒、试剂瓶等容器具；
· 用于封贴微孔板的封板膜或其他替代材料；
· 微孔板振荡器（如有需要）、离心机、旋涡振荡器等辅助设备；
· 恒温培养箱、恒温水浴箱、酶标仪、洗板机。
试剂的准备及储存：
· 试剂盒各组分应储存于2~8℃保存；
· 使用前请确保试剂盒按规定的条件储存，每次实验仅准备所需实验用量的试剂；
· 1×洗液的配制：浓缩洗液（20×) 如有晶体析出，需在37℃下加热至晶体全部溶解后使用。用蒸馏水1:20稀释，例如：10mL浓缩洗涤液加入190mL的蒸馏水，混合均匀。配制好的洗液可以在室温保存1周；
样品采集、预处理及储存：
下面列出的样品收集和储存条件旨在作为一般性指导，不同类型样品的储存、使用稳定性尚未完全评估。
· 血清：使用血清采集管采集全血，室温静置待血细胞凝集后取的血清，或直接在1000×g
下离心15分钟取得血清。操作应柔和，避免溶血发生。获取的血清应及时进行检测，如
不能及时进行检测，应等分为多份，储存在-20℃及以下温度条件，储存时间不超过6个月，冷冻储存血清样品冻融不超过2次。
· 血浆：使用EDTA或肝素采血管收集血浆。全血采集后以1000×g离心15分钟取得血浆。操作应柔和，避免溶血发生。获取的血浆应及时进行检测，如不能及时进行检测，应等分为多份，储存在-20℃及以下温度条件，储存时间不超过6个月，冷冻储存血浆样品冻融不超过2次。
· 不能检测含叠氮钠、悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血样品。
· 样品应无微生物污染。
实验步骤：
使用前将所有试剂置于室温平衡30分钟左右，也可置于37℃温箱快速回温至室温。注意：酶标板未恢复室温前，请勿开封。
1 | 合理安排阳性对照孔、阴性对照孔、样品孔。 |
2 | 阳性对照孔加入阳性对照100uL ，阴性对照孔加入阴性对照100uL 。阴阳对照各设置2孔。 |
3 | 样本孔先加入样品稀释液80uL ，再加入样本20uL。 |
4 | 盖上封板膜，在37℃下孵育30分钟。 |
5 | 洗板5次，最后一次洗板后弃去残留洗液，倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍干。 |
6 | 每孔加入酶结合物工作液100μL。 |
7 | 盖上封板膜，在37℃下孵育30分钟。 |
8 | 洗板5次，最后一次洗板后弃去残留洗液，倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍干。 |
9 | 每孔加入显色剂100uL。 |
10 | 37℃下避光孵育15**分钟。 |
11 | 每孔加入终止液50μL。 |
12 | 使用酶标仪在450nm检测波长及620~690nm参比波长条件下测定吸光度值，如果没有参比波长则仅选择450nm波长进行检测。如果最高浓度校准品OD值过高，应立即在405/630nm双波长条件下检测。 |
阳性判断值cut-0ff：
Cut-Off=阴性对照孔平均OD值×2.1（阴性对照孔OD均值小于0.050时，按0.050计算）。例：阴性对照孔平均OD值为0.100 ，则Cut-OFF值=0. 100×2.1=0.210；
阴性对照孔平均OD值为0.020 ，则Cut-OFF值=0.050×2.1=0.105。
结果判断：
阳性结果：样本OD值＞Cut-OFF值，结果判为阳性；
阴性结果：样本OD值≤Cut-OFF值，结果判为阴性；
产品性能指标：
以下结果基于校准品的浓度值实验得出，未纳入基质效应等其他因素的潜在影响。
检测3份企业阳性参考品，结果均为阳性。检测3份企业阴性参考品，结果均为阴性。
精密度：板内精密度CV＜10%（N=20），板间精密度CV＜15%（N=20）。
特异性（Analytical specificity）：其他相关因子在稀释缓冲液中制备为10μg/mL测定，没有观察到明显的交叉反应。
注意事项：
· 试剂盒内所有成分仅供研究使用！
· 终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，应谨慎操作。
· 试剂盒成分含防腐剂、蛋白成分等，可能引起皮肤过敏反应，应佩带口罩避免吸入薄雾。
· 显色剂、浓缩洗液可能引起皮肤、眼睛和呼吸道刺激，应佩带口罩避免吸入薄雾。
· 佩戴防护手套、防护服、眼睛和面部防护用品，实验操作后彻底洗手。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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