RBITC标记的小鼠抗人CD4单克隆抗体
原理特点
该抗体为小鼠源单克隆抗体，采用罗丹明B异硫氰酸酯（RBITC）橙色荧光标记，荧光光稳定性优于传统FITC，不易淬灭。抗体可特异性靶向结合人T淋巴细胞表面的CD4跨膜糖蛋白，CD4是辅助性T细胞的经典表面标志物，参与免疫信号识别与传导，该抗体种属特异性严格，仅识别人源CD4蛋白，非特异性结合极低，适用于免疫荧光定位、流式细胞分选及外周血、组织浸润T细胞的亚群分析，是人体免疫分型、自身免疫疾病研究的核心工具抗体。
英文名称:human CD4 Mouse mAb, RBITC conjugated
中文名称:RBITC标记的小鼠抗人CD4单克隆抗体
英文别名：CD4(L3T4); CD4 antigen(p55); CD4 Antigen; CD4 molecule; CD4 Receptor; CD4+Lymphocyte deficiency, included; CD4mut; L3T4; Leu3; Ly-4; Lymphocyte antigen CD4; MGC165891; p55; T Cell Antigen T4; T cell antigen T4/LEU3; T cell differentiation antigen L3T4; T cell OKT4 deficiency, included; T cell surface antigen T4/Leu 3; T cell surface antigen T4/Leu3; T Cell Surface Glycoprotein CD4; W3/25; W3/25 antigen; T-cell surface glycoprotein CD4 isoform 1 precursor; CD4_HUMAN.
标记物：RBITC（罗丹明 B 异硫氰酸酯，橙红色荧光）
宿主 / 亚型：小鼠 IgG2b κ，经典克隆 RPA-T4
特异性：识别人 CD4 分子（55kDa 跨膜糖蛋白）
种属：仅人源
验证应用：流式细胞术（CD4 + 辅助 T 淋巴细胞分型）、免疫荧光
蛋白功能：辅助 T 细胞表面标志，HIV 受体，免疫分型、免疫缺陷、炎症研究核心标志物
储存条件：4℃避光，不可冷冻
靶点背景
1. CD4 是辅助性 T 细胞经典表面跨膜糖蛋白，也少量表达于部分巨噬细胞、树突状细胞
2. 作为 MHCⅡ 类分子共受体参与 T 细胞抗原识别、T 细胞活化信号传导，调控适应性免疫应答
3. 流式核心分型指标，用于免疫分型、艾滋病免疫评估、自身免疫病淋巴细胞亚群分析
实验操作关键
样本前处理
细胞样本：用PBS缓冲液轻洗2-3次去除培养基残留，固定（如4%多聚甲醛）后按需进行通透处理（0.3% Triton X-100），封闭液（5% BSA或血清）孵育30-60分钟以降低非特异性结合。
组织样本：石蜡切片需先脱蜡水化，根据抗体类型选择合适的抗原修复方法（如柠檬酸盐缓冲液热修复）；新鲜组织需尽快固定或冷冻保存。
抗体孵育
一抗孵育：通常4℃过夜孵育（12-16小时），或室温孵育1-2小时；孵育时需保证样本完全被抗体覆盖，可放置于湿盒中防止液体挥发。
二抗结合：选择与一抗种属匹配的二抗，室温避光孵育30-60分钟；洗板/洗片需充分，通常用PBS或TBST清洗3-5次，每次5分钟，去除未结合的二抗。
结果检测
荧光检测：荧光标记抗体需避光操作，封片时使用抗淬灭剂，染色后1小时内完成观察，或4℃避光保存不超过4小时。
显色反应：酶标抗体需严格控制底物孵育时间，避免显色过度或不足；终止反应后及时读取数据，部分显色产物易褪色需尽快分析。
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