PE标记的Gasdermin D蛋白抗体
原理特点
该抗体采用藻红蛋白(PE)高亮荧光标记,荧光量子产率高、发光强度大,特异性识别焦亡核心蛋白Gasdermin D(GSDMD)。GSDMD是细胞焦亡通路的关键执行蛋白,被剪切活化后形成细胞膜孔道,介导炎症因子释放与细胞焦亡,是炎症性死亡的核心标志物。该抗体可识别总GSDMD蛋白,PE荧光灵敏度极高,适合流式细胞术检测焦亡细胞比例、免疫荧光定位分析,是细胞焦亡机制研究的核心工具。
英文名称:GSDMD Rabbit pAb, PE conjugated
中文名称:PE标记的Gasdermin D蛋白抗体
英文别名:DF 5L; DF5L; DFNA 5L; DFNA5L; FKSG 10; FKSG10; FLJ12150; Gasdermin D; Gasdermin domain containing 1; Gasdermin domain containing protein 1; Gasdermin domain-containing protein 1; Gasdermin-D; GasderminD; GSDMD_HUMAN; GSDMDC 1; GSDMDC1; Gasdermin-D, N-terminal; GSDMD-NT; hGSDMD-NTD; Gasdermin-D, C-terminal; GSDMD-CT; hGSDMD-CTD.
靶标:GSDMD(焦孔素 D,细胞焦亡核心执行蛋白;活化切割为 N 端打孔结构域)
荧光标记:PE 藻红蛋白;Ex=488/565 nm,Em=578 nm,亮度极高
抗体类型:兔重组单克隆(EPR20859 克隆)/ 兔多克隆
种属反应:人、小鼠、大鼠
适用实验:胞内流式细胞术(焦亡定量)、IF、IHC、WB
功能用途:炎症、细胞焦亡通路研究,LPS + 尼日利亚菌素诱导焦亡模型检测
储存:4℃避光短期,长期 - 20℃避光
靶点背景
1. GSDMD 是细胞焦亡关键执行蛋白,静息状态为全长无活性形式
2. 被 Caspase-1/4/5 剪切后释放 N 端结构域,打孔细胞膜引发焦亡炎症性死亡
3. 炎症、脓毒症、感染免疫、肿瘤焦亡机制研究核心分子
实验操作关键
样本前处理
细胞样本:用PBS缓冲液轻洗2-3次去除培养基残留,固定(如4%多聚甲醛)后按需进行通透处理(0.3% Triton X-100),封闭液(5% BSA或血清)孵育30-60分钟以降低非特异性结合。
组织样本:石蜡切片需先脱蜡水化,根据抗体类型选择合适的抗原修复方法(如柠檬酸盐缓冲液热修复);新鲜组织需尽快固定或冷冻保存。
抗体孵育
一抗孵育:通常4℃过夜孵育(12-16小时),或室温孵育1-2小时;孵育时需保证样本完全被抗体覆盖,可放置于湿盒中防止液体挥发。
二抗结合:选择与一抗种属匹配的二抗,室温避光孵育30-60分钟;洗板/洗片需充分,通常用PBS或TBST清洗3-5次,每次5分钟,去除未结合的二抗。
结果检测
荧光检测:荧光标记抗体需避光操作,封片时使用抗淬灭剂,染色后1小时内完成观察,或4℃避光保存不超过4小时。
显色反应:酶标抗体需严格控制底物孵育时间,避免显色过度或不足;终止反应后及时读取数据,部分显色产物易褪色需尽快分析。
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