HRP标记的JOSD2蛋白抗体
原理特点
本抗体偶联辣根过氧化物酶(HRP),通过HRP催化底物发生氧化显色或化学发光反应实现信号检测,具备灵敏度高、反应速度快、成本低的特点。抗体特异性识别JOSD2去泛素化蛋白,该蛋白参与细胞蛋白稳态调控、基因转录修饰及细胞周期调节,在肿瘤发生、细胞应激反应中发挥重要作用。该抗体适配Western Blot、ELISA、免疫组化等常规分子实验,可高效检测细胞与组织中JOSD2的内源性表达水平,实验重复性极佳。
英文名称:Josephin-2 Rabbit pAb, HRP conjugated
中文名称:HRP标记的JOSD2蛋白抗体
英文别名:FLJ29018; JOS2_HUMAN; JOSD 2; JOSD2; Josephin 2; Josephin domain containing 2; Josephin domain containing protein 2; Josephin domain-containing protein 2; Josephin-2; Josephin2; SBBI54.
标记物:HRP 辣根过氧化物酶,最常用酶促显色标记(ECL 化学发光、DAB 显色)
靶蛋白:JOSD2(Josephin 结构域去泛素化酶,分子量~21kDa)
抗体类型:兔多克隆,抗原亲和纯化
种属:人、小鼠、大鼠
应用:WB 直接化学发光、ELISA、IHC 显色
蛋白功能:调控蛋白去泛素化、细胞周期、肿瘤增殖、内质网稳态调控
优势:HRP 一抗省去二抗孵育步骤,缩短 WB 实验流程
靶点背景
1. JOSD2 属于去泛素化酶家族,介导靶蛋白泛素链去除,调控蛋白质稳定性
2. 参与细胞周期调控、代谢稳态、DNA 损伤修复,异常表达关联肿瘤发生发展
3. WB、IHC 常用,探究泛素化修饰调控通路、肿瘤预后分子机制
实验操作过程注意事项
抗体稀释
使用专用抗体稀释液或含BSA的缓冲液稀释抗体,避免用纯水稀释(纯水中无盐分会导致抗体变性);
严格按照说明书的建议稀释比例进行稀释,若说明书未提供,可通过预实验确定最佳稀释比例(通常1:500-1:10000);
稀释后的抗体需一次性用完,未用完的部分不可再次冻存。
抗体孵育
一抗孵育:通常4℃孵育过夜,可减少非特异性结合,避免室温孵育时间过长导致抗体变性;
二抗孵育:室温孵育1-2小时,孵育期间需避光(荧光二抗);
孵育时需保证抗体均匀覆盖样本表面,避免产生气泡;
实验过程中使用封闭液(如5%BSA或脱脂牛奶)封闭非特异性结合位点,减少背景信号。
洗涤步骤
每步孵育后,需用PBST或TBST洗涤3-5次,每次5分钟,彻底去除未结合的抗体;
洗涤时需轻轻晃动培养板或载玻片,避免用力过猛导致样本脱落;
洗涤液需新鲜配制,避免使用过期或变质的洗涤液。
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