北京生夏蛋白技术有限公司/北京华利世
朱凯15810267201(手机微信)
胰凝乳蛋白酶是一种丝氨酸内蛋白酶,可特异性酶切Tyr,Phe,Trp和Leu的C- 末端的肽键。 也有少量的Met,Ala,Asp和Glu的C-末
端的肽键裂解。其中的残留胰蛋白酶用TLCK灭活后纯化处理。该蛋白酶用Ca2+离子激活并稳定。
物理形态: 质谱级α -Chymotrypsin蛋白酶是冻干粉
分子量:25kDa.
溶解液:建议使用1mM盐酸(含2uM CaCl2) 100ul复溶
储存条件:冻干粉存储在-20℃冰箱;溶解的酶储存在-20℃有效期1周。
保质期:冻干粉在-20℃稳定期12个月
pH 范围: 在PH=7.8时, Chymotrypsin蛋白酶具有活性
适用范围:Chymotrypsin蛋白酶特异性水解变性后蛋白质Y, F, W和L位。
溶液酶解SOP:
胰凝乳蛋白酶按照1:50 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用,在30°C下于100 mM含10 mM CaCl2,pH 7.8的Tris HCl中进行酶切消化2-12小时。
温馨提示:
1. 水浴温度高于37°C时蛋白酶会自我水解
2. 样品消化过程中尿素和盐酸胍的浓度最好小于1M
质量控制|Quality Control
纯度: 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度,α -Chymotrypsin蛋白酶峰强度大于99.0%
专一性:HSA人血清白蛋白样品,ESI-MS/MS质谱分析Y, F, W和L端的专一性大于95.0%
活性: 40u/mg; 单位定义:在pH 7.8和25°C下,每分钟胰凝乳蛋白酶水解1.0μmol BTEE蛋白的量
Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰
LC-MS/MS 质谱分析: 使用Chymotrypsin酶切Bevazumab,酶切条件:30℃,2小时,液质QE联用分析
关键字: Chymotrypsin 蛋白酶 质谱级;/胰凝乳蛋白酶;糜蛋白酶;