人3-羟基丁酸脱氢酶1(BDH1)重组蛋白适用于酮体生成代谢检测、饥饿应激代谢、神经系统能量代谢及代谢疾病体外靶点验证实验。
型号:YS-DB862
产品名称:人3-羟基丁酸脱氢酶1(BDH1)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant 3-Hydroxybutyrate Dehydrogenase 1 (BDH1)
DBH; SDR9C1; D-beta-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,Mitochondrial; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 9C,Member 1
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:41.8kDa
实际分子量:42kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Met1~Arg343 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:9.1
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

酮体氧化还原催化:BDH1 催化 3 - 羟基丁酸与乙酰乙酸可逆转化,伴随 NAD+/NADH 辅酶互变。
340nm 辅酶动态检测:NADH 吸光度变化速率直接测定重组 BDH1 酶活性。
酮体产物色谱定量:液相分离定量两种酮体,计算重组蛋白催化转化率。
免疫印迹蛋白定量鉴定:抗体检测重组蛋白浓度、分子量与样品纯度。
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 人3-羟基丁酸脱氢酶1;BDH1;重组蛋白;
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