人3-羟基异丁酸脱氢酶(HIBADH)重组蛋白用于支链氨基酸分解代谢分析、代谢紊乱筛查、线粒体功能调控相关体外酶活测定实验。
型号：YS-DB2865
产品名称：人3-羟基异丁酸脱氢酶(HIBADH)重组蛋白
物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Recombinant 3-Hydroxyisobutyrate Dehydrogenase (HIBADH)
NS5ATP1
酶与激酶
物种：Homo sapiens (Human，人)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：线粒体
预测分子量：27.1kDa
实际分子量：27kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：Met1~Ala226 with N-terminal His Tag
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
纯度：> 90%
等电点：7.7
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：
支链羟基酸脱氢反应：依赖 NAD + 氧化 3 - 羟基异丁酸生成酮酸，辅酶还原速率表征酶活。
紫外分光光度法测 NADH 生成：340nm 吸光度上升速率定量重组 HIBADH 活性。
有机酸产物液相定量：色谱分离底物与产物，核算重组蛋白催化效率。
免疫特异性纯度检测：特异性抗体验证重组蛋白表达正确，定量蛋白含量。
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复溶操作要点：
复溶前准备
工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。
缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：
基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。
缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。
静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字： 人3-羟基异丁酸脱氢酶;HIBADH;重组蛋白;
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