人二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)重组蛋白 新品

人二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)重组蛋白适用于嘧啶分解代谢酶活检测、抗肿瘤药物代谢分型、个体化用药体外评价实验。

型号：YS-DB581

产品名称：人二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)重组蛋白

物种：Homo sapiens (Human，人)

英文名称：Recombinant Dihydropyrimidine Dehydrogenase (DPYD)

DPD; DHPDHase; Dihydrothymine dehydrogenase; Dihydrouracil dehydrogenase

酶与激酶

代谢通路

物种：Homo sapiens (Human，人)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：细胞质

预测分子量：30.6kDa

实际分子量：31kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ile781~Cys1025 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：6.4

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

Western Blot 验证：DPYD 特异性抗体特异性结合重组蛋白，电泳条带分子量匹配理论分子量。

SDS-PAGE 纯度分析：电泳分离杂质蛋白，灰度统计目标蛋白纯度占比。

BCA 比色定量蛋白浓度：还原显色体系定量样品浓度。

嘧啶脱氢酶活性检测：NADPH 依赖还原尿嘧啶、胸腺嘧啶，监测辅酶吸光度下降速率测定脱氢酶活性。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。