人二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)重组蛋白用于脱氢酶活性测定、嘧啶从头合成通路分析、自身免疫病靶向抑制剂体外筛选。
型号:YS-DB948
产品名称:人二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH)
DHOdehase; Dihydroorotate oxidase; Dihydroorotate dehydrogenase (quinone), mitochondrial
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::细胞膜
预测分子量:42.4kDa
实际分子量:42kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Arg35~Asp392 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:9.5
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

WB 特异性验证:DHODH 特异性抗体抗原结合,条带分子量与理论预期一致。
SDS-PAGE 纯度质控:电泳分离杂蛋白,灰度计算目标蛋白纯度比例。
BCA 显色定量浓度:肽键还原铜离子显色,OD 值定量蛋白浓度。
脱氢酶活性检测:嘧啶合成关键酶,氧化二氢乳清酸生成乳清酸,监测特征吸光度变化测定酶活。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 人二氢乳清酸脱氢酶;DHODH;重组蛋白;
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