人羧肽酶A5(CPA5)重组蛋白开展多肽末端氨基酸水解、神经肽加工、组织发育调控体外底物筛选与酶活定量实验。
型号：YS-DB2634
产品名称：人羧肽酶A5(CPA5)重组蛋白
物种：Homo sapiens (Human，人)
英文名称：Recombinant Carboxypeptidase A5 (CPA5)
酶与激酶
物种：Homo sapiens (Human，人)
来源：原核表达
宿主E.coli
内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位：：分泌
预测分子量：-
实际分子量：-(差异分析请参阅说明书)
片段与标签：N-terminal His Tag
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
纯度：> 97%
等电点：-
应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格10μg50μg200μg1mg5mg
检测原理：
多肽 C 端氨基酸切除酶活测定：以特异性合成多肽为底物，CPA5 水解释放游离氨基酸，色谱 / 显色法定量水解产物，计算酶活性。
亚型特异性免疫定量原理：CPA5 专属抗体特异性结合重组蛋白，夹心 ELISA 体系比色，换算蛋白浓度。
Western Blot 结构完整性检测：电泳转膜抗体杂交，匹配理论分子量，判定重组蛋白是否全长正确表达。
锌离子依赖活性佐证：锌离子为 CPA5 催化必需辅因子，去金属螯合处理后酶活丧失，排除其他蛋白酶干扰检测。
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复溶操作要点：
复溶前准备
工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。
缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：
基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。
缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。
静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字： 人羧肽酶A5;CPA5;重组蛋白;
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