人肽酶抑制因子16(PI16)重组蛋白用于内源蛋白酶活性拮抗调控、肿瘤侵袭抑制、血管稳态维持体外功能验证实验。
型号:YS-DB29
产品名称:人肽酶抑制因子16(PI16)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)
MSMBBP; CRISP9; PSPBP; Microseminoprotein, Beta-Binding Protein; Protease Inhibitor 16; PSP94-binding protein; Cysteine-rich secretory protein 9
酶与激酶
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:54.5kDa
实际分子量:60kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Leu28~Gly247 with N-terminal His and GST Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 97%
等电点:5.3
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

蛋白酶拮抗活性检测:PI16 竞争性结合靶蛋白酶,抑制其底物水解能力,通过残余蛋白酶活性反向定量 PI16 抑制活性。
特异性抗体免疫定量:PI16 特异性抗体识别重组蛋白,ELISA 比色法测定蛋白表达浓度。
Western Blot 结构验证:电泳转膜杂交,特征条带验证重组蛋白完整表达,无截短突变。
竞争性结合模式佐证特异性:梯度浓度 PI16 梯度抑制靶酶活性,剂量依赖性抑制曲线证明抑制功能真实有效。
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复溶操作要点:

复溶前准备
工具消毒:移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理,避免引入污染。
缓冲液选择:优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液,若无推荐可使用:
基础型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保护型:在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢剂(如0.05% Triton X-100),酶类需添加辅酶因子
复溶步骤
短暂离心:将冻干蛋白管置于离心机,4℃下8000rpm离心30秒,使底部蛋白集中。
缓慢加液:沿管壁缓慢加入适量缓冲液,避免直接冲击蛋白沉淀。
温和溶解:轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸,禁止涡旋振荡(易导致蛋白变性)。
静置溶解:4℃静置10-30分钟,难溶蛋白可延长至1小时,期间每隔10分钟轻轻混匀一次。
关键字: 人肽酶抑制因子16;PI16;重组蛋白;
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