人糖原磷酸化酶B(PYGB)重组蛋白适用于糖原分解代谢酶活性检测、肌肉能量供给、糖原贮积病相关体外代谢通路验证实验。
型号:YS-DB1415
产品名称:人糖原磷酸化酶B(PYGB)重组蛋白
物种:Homo sapiens (Human,人)
英文名称:Recombinant Glycogen Phosphorylase, Brain (PYGB)
GPBB
酶与激酶
代谢通路
肝胆病学
物种:Homo sapiens (Human,人)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:32.3kDa
实际分子量:33kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Pro477~Glu731 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 95%
等电点:9.1
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

糖原磷酸解酶活检测:PYGB 催化糖原磷酸解生成葡萄糖 - 1 - 磷酸,定量产物生成速率测定磷酸化酶催化活性。
同工型特异性免疫定量:PYGB 脑型特异性抗体区分肝、肌肉型糖原磷酸化酶,ELISA 定量重组蛋白浓度。
免疫电泳纯度质控:SDS-PAGE 转膜杂交,验证分子量正确性,分析杂蛋白污染比例。
别构调节剂敏感性定性:AMP 激活、葡萄糖抑制 PYGB 活性,特征调控模式区分其他糖原代谢酶。
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蛋白复溶与保存:

1. 复溶前准备
实验环境:在超净工作台内进行操作,避免污染
试剂准备:无菌水、PBS缓冲液或产品说明书指定的复溶液
工具准备:无菌移液器、枪头、离心管
2. 复溶步骤
短暂离心:将蛋白冻干粉管短暂离心(1000rpm,1min),使管壁和管盖的蛋白粉末集中到管底
加入复溶液:按照说明书推荐的体积加入无菌水或指定复溶液,轻轻吹打混匀,避免涡旋振荡防止蛋白变性
静置溶解:室温静置5-10分钟,期间可轻轻颠倒离心管帮助溶解,避免剧烈振荡
分装保存:根据实验需要将复溶后的蛋白分装成小份(如10μg/份),避免反复冻融
3. 保存条件
长期保存:-20℃或-80℃避光保存,加入50%甘油可提高稳定性
短期保存:4℃可稳定保存1-2周,需避免反复冻融
注意:
避免接触强氧化剂、强酸强碱环境
若蛋白出现沉淀或浑浊,可4℃放置或短暂离心后取上清使用
关键字: 人糖原磷酸化酶B;PYGB;重组蛋白;
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