类胡萝卜素(carotenoid)含量测试盒
产品介绍:
类胡萝卜素是一种脂溶性且具有营养特性的化合物,给植物和动物提供天然色素,是重要的抗氧化剂,并有能力转换为必需维生素。类胡萝卜素可预防细胞,组织和基因损毁,增强身体免疫系统,抵御感染,减少癌症风险,保护心脏。
测定原理
样品通过混合有机溶剂萃取,类胡萝卜素与非类胡萝卜素成分分离,在440nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、烘箱,100目筛、三角瓶或烧杯、漏斗,纱布、玻璃试管、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。
产品名称 | 类胡萝卜素(carotenoid)含量测试盒 |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 分光光度法 |
分类 | 光合作用系列 |
货号 | YSH3348 |
检测原理:
有机溶剂萃取:丙酮‑乙醇或石油醚混合有机溶剂破坏植物细胞膜,将脂溶性类胡萝卜素从组织中溶出。
色素分离提纯:离心去除残渣杂质,获得色素上清液;叶绿素可通过皂化去除避免干扰。
特征波长比色:类胡萝卜素在 450‑470 nm 波段存在最大吸收峰,测定该波长吸光度。
朗伯‑比尔定律定量:使用已知浓度 β‑胡萝卜素标准曲线,计算样品类胡萝卜素含量。
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操作步骤:
操作仪器预热:可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到620nm和510nm,蒸馏水调零标准曲线绘制:
直链淀粉标准曲线:将直链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度,各取0.1mL,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值,绘制标准曲线
支链淀粉标准曲线:将支链淀粉标准品稀释成0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL系列浓度,各取0.1mL,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值,绘制标准曲线样本测定:取0.1mL待测样本,加入0.9mL碘试剂,摇匀后测定620nm和510nm处的吸光值
ELISA法操作试剂准备:将试剂盒从冷藏环境中取出,室温平衡15-30分钟;将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加温育:除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)显色:每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min终止:每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算:绘制标准曲线,按曲线方程计算样本浓度
关键字: 类胡萝卜素;carotenoid;测试盒;
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