土壤蔗糖酶(SSC)测试盒
产品介绍:
S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理:
S-SC催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
产品名称 | 土壤蔗糖酶(SSC)测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 土壤系列 |
货号 | YSH3461 |
检测原理:
酶促水解底物原理:土壤蔗糖酶催化蔗糖(二糖)水解,生成葡萄糖与果糖两种还原单糖。
还原糖显色反应原理:在沸水碱性条件下,生成的还原糖可与 3,5‑二硝基水杨酸 (DNS) 试剂反应,DNS 被还原生成棕红色氨基化合物。
分光光度定量原理:棕红色产物在 540 nm 波长下比色;葡萄糖标准梯度制作曲线,求出反应生成还原糖总量。
对照扣除原理:灭活土壤对照管扣除土壤本身含有的可溶性还原糖;以单位质量土壤单位时间产生还原糖的量表征蔗糖酶活性。
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操作步骤:
比色法/分光光度法/微量法操作仪器预热:可见分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到500nm/550nm,蒸馏水调零试剂配制:
试剂二:临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用
试剂三:临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用样本测定:
试剂名称(μL) 空白管 测定管
蒸馏水/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
试剂三 100 100
混匀后37℃水浴10min,记录500nm/550nm处的吸光值A空白和A测定标准曲线绘制:将PLD标准品稀释成0、1、2、3、4、5U/L系列浓度,同样处理,测定500nm/550nm处的吸光值,绘制标准曲线
ELISA法操作试剂准备:将试剂盒从冷藏环境中取出,室温平衡15-30分钟;将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加温育:除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)显色:每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min终止:每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算:绘制标准曲线,按曲线方程计算样本浓度
关键字: 土壤蔗糖酶;SSC;测试盒;
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