酪氨酸解氨酶(TAL)测试盒
产品介绍:
TAL广泛存在于植物和微生物中,是苯丙氨酸代谢途径的关键酶之一。TAL能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)直接将酪氨酸转化为香豆酸,香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物。
测定原理:
TAL能够分解酪氨酸产生香豆酸,使反应溶液333nm下的吸光度随反应时间而上升,根据吸光度的变化率可计算出TAL活性。
需自备的仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板(UV板)、研钵、冰和蒸馏水
产品名称 | 酪氨酸解氨酶(TAL)测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、紫外分光光度法 |
分类 | 氧化与抗氧化系列 |
货号 | YSH3347 |
检测原理:
脱氨反应:TAL催化酪氨酸脱氨生成对香豆酸
光谱检测:对香豆酸在333nm波长下有特征吸收峰,通过测定吸光度随时间的变化率计算TAL活性
反应优化:反应体系的最适pH为8.5-9.0,最适温度为37-40℃
样本适用性:广泛应用于植物组织、微生物菌液等样本的检测,可用于研究苯丙素类化合物的生物合成
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操作步骤:
标准曲线绘制:
取6支试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液,补加提取液至1mL。
每管加入2mL底物缓冲液,37℃水浴预热5分钟。
加入0.5mL显色剂,混匀后37℃水浴准确反应10分钟。
立即加入2mL终止液终止反应,于405nm波长下测定吸光度,以标准品浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
样本检测:
取1mL待测样本(若样本活性过高,需用提取液稀释),加入2mL底物缓冲液,37℃水浴预热5分钟。
加入0.5mL显色剂,混匀后37℃水浴准确反应10分钟。
立即加入2mL终止液终止反应,于405nm波长下测定吸光度,根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。
微量酶标仪法操作步骤
加样:在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔,每孔加50μL对应溶液。
反应:每孔加入100μL底物缓冲液,37℃孵育30分钟。
终止:每孔加入50μL终止液。
读数:用酶标仪在405nm波长下测定吸光度,计算酶活性。
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