谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶(GOT/AST)测试盒
产品介绍:
GOT( 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
测定原理
GOT催化 α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定505nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。
需自备的仪器和用品
可见分光光计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
产品名称 | 谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶(GOT/AST)测试盒 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 氨基酸代谢系列 |
货号 | YSH3304 |
检测原理:
反应原理:AST 催化天冬氨酸 +α‑酮戊二酸 → 草酰乙酸 + 谷氨酸;草酰乙酸脱羧生成丙酮酸,再与显色剂反应显色。
检测靶标:线粒体 + 胞浆中天冬氨酸氨基转移酶活性。
读数依据:505 nm 读取棕红色产物吸光度,丙酮酸标准曲线计算酶活力。
判定逻辑:设置底物空白;区分 ALT/AST 两条反应曲线;避免草酰乙酸自发分解干扰。
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操作步骤:
操作仪器预热:将可见分光光度计预热30min,调节波长至540nm,用蒸馏水调零标准曲线绘制:
取6支具塞刻度试管,分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL葡萄糖标准液(10mg/mL)
用蒸馏水补至1.0mL,再加入2.0mL显色工作液,沸水浴5min
立即用流水冷却至室温,定容至25mL,摇匀后测定540nm处吸光值
以葡萄糖浓度(mg/mL)为横坐标,吸光值为纵坐标绘制标准曲线样本测定:
试剂名称(μL) 空白管 测定管
提取液/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
混匀后37℃水浴30min,立即加入2.0mL显色工作液,沸水浴5min
流水冷却至室温,定容至25mL,摇匀后测定540nm处吸光值A空白和A测定
关键字: 谷草转氨酶/天冬氨酸氨基转氨酶;GOT/AST;测试盒;
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