甘油三酯(TG)含量测试盒
产品介绍:
TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。
测定原理:
用异丙醇提取 TG,脂蛋白酯酶水解 TG 生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘
油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成 H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林
偶联酚,生成有色化合物,在 505 nm 处有特征吸收峰。
自备仪器和用品:
酶标仪、台式离心机、可调式移液枪、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水
产品名称 | 甘油三酯(TG)含量测试盒 |
规格 | 100管/96样、50管/48样 |
检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
分类 | 脂肪酸代谢系列 |
货号 | YSH3293 |
检测原理:
酶促水解:甘油三酯在脂蛋白酯酶作用下水解为甘油和脂肪酸
甘油氧化:甘油在甘油激酶和甘油磷酸氧化酶作用下氧化生成过氧化氢
显色反应:过氧化氢在过氧化物酶作用下与4-氨基安替比林和酚类物质反应生成红色醌类化合物
检测波长:在500-550nm波长下测定吸光度,吸光度与甘油三酯含量正相关
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操作步骤:
比色法/COD-PAP法/分光光度法操作仪器预热:分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长到500~520nm,蒸馏水调零试剂配制:
试剂二:临用前加入10mL蒸馏水充分溶解备用
试剂三:临用前加入20mL蒸馏水充分溶解备用样本测定:
试剂名称(μL) 空白管 测定管
蒸馏水/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
试剂三 100 100
混匀后37℃水浴15min,记录500~520nm处的吸光值A空白和A测定标准曲线绘制:将FC标准品稀释成0、0.031、0.063、0.125、0.25、0.5、1μmol/L系列浓度,同样处理,测定500~520nm处的吸光值,绘制标准曲线
ELISA法操作试剂准备:将试剂盒从冷藏环境中取出,室温平衡15-30分钟;将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加温育:除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)显色:每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min终止:每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算:绘制标准曲线,按曲线方程计算样本浓度
关键字: 甘油三酯;TG;测试盒;
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