本试剂盒采用竞争性ELISA检测原理,将TG相关抗原包被于酶标板微孔,封闭非特异性位点后,加入标准品、待测大鼠血清样本及TG特异性抗体,样本中的TG与固相抗原竞争结合抗体,样本TG含量越高,固相结合的抗体量越少,洗板后加入酶标二抗孵育,底物显色后终止反应,测定吸光度值,通过标准曲线的负相关关系定量计算样本中TG的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠甘油三酯(TG)ELISA试剂盒
英文名称:TG ELISA Kit
货号:Y-E1050
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度0.05mmol/L,可精准检测大鼠血清、组织匀浆中微量TG
检测范围:0.1mmol/L~10mmol/L,覆盖大鼠高脂、代谢紊乱模型TG浓度区间
反应时间:总时长80分钟,孵育50分钟,显色30分钟,快速检测
保存条件:2~8℃冷藏保存,显色液、终止液避光存放
有效期:未开封有效期6个月,开封后30天内用完
显色系统:脂质专用TMB显色体系,抗脂质干扰能力强
检测波长:450nm标准检测波长
标准曲线绘制:6梯度浓度标准品,四参数拟合,R²≥0.996
特异性:专一识别大鼠甘油三酯,对胆固醇、脂肪酸无交叉反应
重复性:板内CV≤3.6%,板间CV≤5.6%
注意事项:样本采集后空腹检测最佳,避免食物脂质干扰;样本避免反复冻融;试剂混匀后使用;显色时间严格统一。
实验前准备工作:

1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
实验步骤如下:

试剂盒试剂室温平衡 25min,洗涤液 1:20 稀释,大鼠血清严禁溶血、脂血过度样本舍弃。
酶标板各微孔加入 100μL TG 梯度标准品、待测血清、空白缓冲液。
酶偶联 TG 特异性抗体 100μL 每孔,封板 37℃孵育 59min。
洗涤浸泡 29s,洗 4 次,吸干微孔残留洗液。
避光显色液 100μL,37℃孵育 14min。
终止液 50μL 混匀微孔液体。
450nm 读取 OD 值,定量大鼠血清甘油三酯 TG 含量。
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