商品属性：
产品名称 | 磷脂酶A2(PLA2)测试盒 | 货号 | YSH3355 |
规格 | 100管/48样、50管/24样 | 检测方法 | 微量法、可见分光光度法 |
商品介绍：
磷脂酶A2（EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶，广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中，参与脂肪消化，精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程，在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。
测定原理
磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸胆碱（HEPC)产生游离巯基，与DTNB反应生成黄色物质，在412nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、超速冷冻离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
检测原理：
磷脂水解反应：PLA2催化磷脂水解生成脂肪酸和溶血磷脂
脂肪酸检测：生成的脂肪酸在酰基辅酶A合成酶和酰基辅酶A氧化酶作用下氧化生成过氧化氢，过氧化氢与显色剂反应生成有色产物
检测波长：在500-550nm波长下测定吸光度，吸光度与PLA2活性正相关
反应条件：最适pH为7.5-8.0，最适温度为37℃
样本前处理方法：
细菌或培养细胞样本收集：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清破碎：按照细菌或细胞数量（10⁴个）:提取液体积(mL)为500~1000:1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）离心：8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测
组织样本取样：按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例（建议称取约0.05g组织，加入0.5mL提取液），进行冰浴匀浆离心：8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测
血清/血浆样本
血清(浆)样品：直接检测
土壤样本取样：将样本风干、粉碎、过40目筛，然后称取约0.5g、加入2mL提取液（甲苯）提取：震荡提取20min，12000rpm，4℃，离心20min，取上清待测
公司正在出售的产品：
尿素氮测试盒微量法 | 中性粒细胞碱性磷酸酶检测试剂盒 NAP ELISA Kit | 蛇形毛圆线虫PCR检测试剂盒 |
脲酶(UE)测试盒微量法 | 制瘤素M受体检测试剂盒 OSMR ELISA Kit | 牡蛎疱疹病毒1型染料法荧光定量PCR试剂盒 |
柠檬酸(CA)含量测试盒微量法 | 中性粒细胞颗粒抗体检测试剂盒 ANGA ELISA Kit | 猪细环病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 |
柠檬酸合酶(CS)测试盒微量法 | 转录因子SOX-5检测试剂盒 SOX5 ELISA Kit | 猫免疫缺陷病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 |
葡萄糖6磷酸酶(G6P)测试盒紫外分光光度法 | 异丙肾上腺素检测试剂盒 iso-Hyd ELISA Kit | 猫疱疹病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 |
脯氨酸(PRO)含量测试盒微量法 | 肿瘤坏死因子相关激活诱导因子检测试剂盒 TRANCE ELISA Kit | 猫传染性腹膜炎病毒（猫传腹病毒）染料法荧光定量PCR试剂盒 |
脯氨酸脱氢酶(ProDH)测试盒微量法 | 磷脂酶A2(PLA2)测试盒牛羊口蹄疫抗体检测卡 | 猫疱疹病毒1型染料法荧光定量PCR试剂盒 |
葡萄糖6磷酸(6PG)测试盒微量法 | 真核细胞延伸因子2检测试剂盒 eEF2 ELISA Kit | 蛇形隐孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 |
胼胝质含量测试盒荧光法 | 真胰岛素检测试剂盒 TI ELISA Kit | 牡蛎疱疹病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 |
测定操作步骤：
比色法/分光光度法/微量法操作仪器预热：可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到500nm/550nm，蒸馏水调零试剂配制：
试剂二：临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用
试剂三：临用前加入1.5mL蒸馏水充分溶解备用样本测定：
试剂名称(μL) 空白管 测定管
蒸馏水/样本 100 100
试剂一 700 700
试剂二 100 100
试剂三 100 100
混匀后37℃水浴10min，记录500nm/550nm处的吸光值A空白和A测定标准曲线绘制：将PLD标准品稀释成0、1、2、3、4、5U/L系列浓度，同样处理，测定500nm/550nm处的吸光值，绘制标准曲线
ELISA法操作试剂准备：将试剂盒从冷藏环境中取出，室温平衡15-30分钟；将20×洗涤缓冲液用蒸馏水20倍稀释后备用加样：
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃
设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加温育：除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min洗涤：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）显色：每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min终止：每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值结果计算：绘制标准曲线，按曲线方程计算样本浓度
关键字： 磷脂酶A2;PLA2;测试盒;
上海研生实业有限公司成立于2011年专业销售各种科学实验产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、等多个研究及应用领域。旗下有“上研生"品牌。
我们努力将欧美进口品牌的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视国内科研市场的产品开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。
同时国家对于生物行业的发展给予极大的重视，更多地侧重于科研的投入。公司的服务和业务在同行获得认可。也具备丰富的管理经验，同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想，更有责任感，是您科研道路上值得信赖的伙伴。
公司的理念是：以诚信为本，努力打造优质品牌，为您提供产品的售中、售后服务。