血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒

血清高密度脂蛋白(HDLC)测试盒

产品介绍：

高密度脂蛋白为血清蛋白之一，主要由肝脏合成，运载周围组织中的胆固醇，再转化为胆汁酸或直接通过胆汁从肠道排出，是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子，俗称“血管清道夫”，对冠心病的临床诊断是一个重要的参考指标。

测定原理

用沉淀剂分离血清中的高密度脂蛋白胆固醇，利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸，从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；再利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在500nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品

离心机，恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

检测原理：

沉淀法：使用沉淀剂沉淀血清中的低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL），只保留高密度脂蛋白（HDL）

酶促反应：HDL中的胆固醇在胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶作用下氧化生成过氧化氢

显色反应：过氧化氢在过氧化物酶作用下与4-氨基安替比林和酚类物质反应生成红色醌类化合物

检测波长：在500-550nm波长下测定吸光度，吸光度与HDLC含量正相关
公司正在出售的产品：

操作步骤：

标准曲线绘制：

取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液，补加提取液至1mL。

每管加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

样本检测：

取1mL待测样本（若样本活性过高，需用提取液稀释），加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。

微量酶标仪法操作步骤

加样：在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔，每孔加50μL对应溶液。

反应：每孔加入100μL底物缓冲液，37℃孵育30分钟。

终止：每孔加入50μL终止液。

读数：用酶标仪在405nm波长下测定吸光度，计算酶活性。