小鼠5'-核苷酸酶ⅠB(NT5C1B)重组蛋白参与核苷酸降解代谢调控、细胞能量稳态分析、核苷类药物代谢相关体外酶学实验。
型号:YS-DB2651
产品名称:小鼠5'-核苷酸酶ⅠB(NT5C1B)重组蛋白
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名称:Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic IB (NT5C1B)
AIRP; CN-IB; Autoimmune infertility-related protein
酶与激酶
物种:Mus musculus (Mouse,小鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::分泌
预测分子量:39.1kDa
实际分子量:39kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Arg261~Asn573 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:7.9
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

核苷酸脱磷酸催化:NT5C1B 水解核苷 5' 单磷酸,脱去磷酸基团生成核苷。
释放无机磷通过磷钼蓝显色法比色定量,表征核苷酸酶活性。
WB 验证小鼠源重组蛋白表达正确性、杂蛋白占比。
底物偏好验证,仅 5' 核苷酸底物高效反应,3'/2' 核苷酸几乎无活性,验证酶底物特征。
公司正在出售的产品:

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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 小鼠5'-核苷酸酶ⅠB;NT5C1B;重组蛋白;
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