竞争酶联免疫检测原理，微孔板包被 25 (OH) D3 特异性抗原，样本中大鼠 25 羟基维生素 D3 与固相抗原竞争结合酶标记抗 VD3 抗体，洗板去除未结合物后显色检测 OD 值，依据标准曲线定量血清、组织匀浆中 25 (OH) D3 含量。
产品参数：
产品名称 | 大鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1412 |
英文名称 | HVD3 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度：最低检测浓度0.2ng/mL，精准检测大鼠血清维生素D3代谢产物
检测范围：0.5ng/mL - 50ng/mL
反应时间：总时长90分钟，样本孵育60分钟，酶结合物孵育30分钟
保存条件：所有试剂2-8℃避光保存，严禁冷冻，标准品开封后分装冻存
有效期：未开封有效期6个月，分装标准品-20℃可保存3个月
显色系统：高灵敏度TMB显色体系，显色信号强、背景低
检测波长：450nm主波长检测
标准曲线绘制：6梯度稀释标准品，四参数Logistic拟合，R²≥0.997
特异性：特异性识别25羟基维生素D3，与维生素D2、维生素D无交叉反应
重复性：板内CV≤4.5%，板间CV≤6.5%
注意事项：样本采集后避光保存，避免维生素D降解；加样精准，避免气泡产生；终止后10分钟内完成检测，保证数据准确
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程：
试剂平衡：试剂盒室温静置 25min，浓缩洗涤液 1:20 稀释，冷藏样本室温解冻混匀。
标准品稀释：25 (OH) D3 标准品复溶后梯度稀释 6 组浓度，设置空白调零孔。
加样孵育：每孔 50μL 标准品 / 样本，添加 HRP 酶标记抗体 50μL，密封 37℃避光孵育 60min。
洗板操作：弃去液体，洗涤液浸泡 30s，拍干孔内残液，重复洗板 5 次。
底物显色：每孔加显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃孵育 16min。
终止读数：终止液 50μL 混匀，10min 内酶标仪检测 450nm OD 值。
数据计算：标准曲线计算样本 25 羟基维生素 D3 浓度，评估大鼠维生素 D 水平。
关键字： 大鼠25羟基维生素D3;OH)D3/25 HVD3;ELISA试剂盒;
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