本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板固定纯化的大鼠LIF特异性捕获抗体,加入梯度标准品及大鼠生物样本后,样本中的LIF抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗涤干净后加入酶标记的LIF检测抗体,形成稳定的三元夹心复合物,通过底物酶促显色反应产生特异性显色,终止反应后检测吸光度,对照标准曲线精准测定大鼠样本中LIF的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒
英文名称:LIF ELISA Kit
货号:Y-E1497
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤1.2pg/mL
检测范围:3pg/mL - 800pg/mL
反应时间:全程3.6小时标准孵育流程
保存条件:2-8℃低温保存,标准品-20℃分装冻存
有效期:原装6个月,分装标准品1个月有效
显色系统:高灵敏TMB显色体系
检测波长:450nm/620nm双波长检测
标准曲线绘制:8梯度浓度,曲线拟合R²≥0.995
特异性:特异性识别大鼠LIF,与细胞生长抑制因子无交叉反应
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%
注意事项:样本避免反复冻融;孵育过程保持恒温恒湿;显色时间精准把控
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

室温平衡试剂盒 28min,稀释 LIF 标准品,分置酶标板三组微孔;
每孔加入 50μL 梯度标准品或大鼠血清样本,空白孔填充稀释缓冲液;
即刻加入 100μL 酶标抗 LIF 特异性抗体,覆膜封闭板面;
37℃避光孵育 64min,一步共孵育生成抗原抗体复合物;
洗板液浸泡微孔 30s,拍干,循环洗板 5 次;
避光添加显色底物混合液 100μL,37℃避光显色 14min;
终止液混匀微孔液体,450nm 读数,计算 LIF 含量。
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关键字: 大鼠白血病抑制因子;LIF;ELISA试剂盒;
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