竞争酶联免疫吸附法,酶标板包被 8-OHdG 抗原,样本中氧化损伤标志物 8 羟基脱氧鸟苷与固相抗原竞争结合酶标记抗体,洗涤显色后检测吸光值,对照标准曲线定量体液、组织中 DNA 氧化损伤产物水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1094 |
英文名称 | 8-OHdG ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.05ng/mL,精准检测DNA氧化损伤标志物
检测范围:0.1ng/mL - 10ng/mL
反应时间:总时长110分钟,样本孵育75分钟,二抗孵育35分钟
保存条件:2-8℃避光保存,标准品、抗体组分严禁冷冻
有效期:原装试剂盒6个月有效期
显色系统:超高灵敏TMB显色体系,适配微量损伤指标检测
检测波长:450nm主波长检测
标准曲线绘制:6梯度标准品,四参数拟合,R²≥0.998
特异性:特异性识别8-OHdG,与正常脱氧鸟苷、核酸片段无交叉反应
重复性:板内CV≤4%,板间CV≤6%
注意事项:样本避免核酸污染、氧化损伤;全程无酶耗材操作;孵育温度精准恒定,保证抗原抗体结合效率
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂盒室温放置 28min,洗涤液稀释 20 倍,尿液、细胞上清样本混匀。
标准品稀释:8-OHdG 冻干标准品复溶梯度稀释 6 浓度,空白对照孔。
加样孵育:50μL 标准品 / 样本 + 50μL 酶标抗体,封膜 37℃避光孵育 63min。
洗板操作:洗涤液浸泡 32s,拍干,洗板 5 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 16min。
终止读数:终止液混匀,9min 内读取 450nm 吸光度。
数据计算:曲线计算样本 8-OHdG 含量,评估氧化 DNA 损伤程度。
关键字: 大鼠8羟基脱氧鸟苷;8-OHdG;ELISA试剂盒;
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