大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争性ELISA检测原理，针对大鼠cGMP建立特异性检测体系，固相载体包被cGMP偶联抗原，样本中的内源性cGMP竞争结合抗体，经酶促显色反应后检测吸光度，吸光度与样本cGMP浓度负相关，结合标准曲线完成定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.05nmol/L

检测范围：0.1nmol/L～10nmol/L

反应时间：总时长95min，孵育65min，显色15min，读数5min

保存条件：2～8℃避光冷藏，小分子试剂禁止冷冻

有效期：未开封6个月，开封后1个月内有效

显色系统：高灵敏小分子专属TMB显色系统

检测波长：450nm检测

标准曲线绘制：标准品梯度稀释，四参数拟合曲线，R²≥0.990

特异性：特异性识别大鼠cGMP，不与cAMP等环核苷酸发生交叉反应

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：样本需新鲜制备，避免核苷酸降解；全程低温操作，减少样本损耗；试剂现配现用。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂盒室温回温 33min，复溶 cGMP 小分子标准品配制梯度稀释液，规划酶标板孔位。

一步法直接加样 100μL 梯度标准品与大鼠组织提取上清至对应孔，空白孔添加稀释缓冲液。

覆膜封板，37℃孵育 79min，固相载体捕获小分子 cGMP。

倾倒废液，洗涤液浸润每孔 37s，循环洗板 5 次，充分去除未结合游离小分子。

所有样品孔加入 HRP 标记特异性抗体 100μL，避光 37℃孵育 33min。

分加显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡后避光显色 17min。

滴加终止液终止酶促反应，酶标仪 450nm 读取 OD 值，换算样本 cGMP 含量。