双抗体夹心 ELISA 体系,酶标板固定抗大鼠 NTX 捕获抗体,样本 Ⅰ 型胶原 N 末端肽与固相抗体结合,加入 HRP 标记检测抗体形成夹心结构,洗板显色测吸光度,依据标准曲线定量骨吸收标志物 NTX。
产品参数:
产品名称 | 大鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1163 |
英文名称 | NTX ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.2ng/mL,骨吸收标志物精准检测
检测范围:0.5ng/mL - 50ng/mL
反应时间:总时长90分钟,样本孵育60分钟,酶二抗孵育30分钟
保存条件:2-8℃避光保存,所有试剂严禁反复冻融
有效期:未开封原装6个月有效
显色系统:优化TMB显色体系,小分子肽段检测信噪比高
检测波长:450nm主波长检测
标准曲线绘制:6梯度标准品,四参数拟合,R²≥0.995
特异性:特异性结合NTX,与CTX、其他胶原末端肽无交叉反应
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%
注意事项:避免样本反复冻融导致肽段降解;孵育密封保湿,防止液体蒸发;洗涤步骤规范,降低背景值
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂平衡:全套试剂室温放置 30min,20 倍洗涤液稀释,骨组织上清室温平衡。
标准品稀释:NTX 标准品溶解梯度稀释 6 组浓度,空白对照孔。
加样孵育:50μL 标准品 / 样本 + 50μL 酶标记抗体,封膜 37℃避光孵育 64min。
洗板操作:洗涤液浸泡 34s,拍干,洗板 6 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 17min。
终止读数:终止液混匀,10min 内 450nm 读数。
数据计算:定量 NTX 表达,反映大鼠骨代谢吸收活性。
关键字: 大鼠Ⅰ型胶原N末端肽;NTX;ELISA试剂盒;
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