双抗体夹心 ELISA 原理,板底预包被 CⅠCP 特异性捕获抗体,样本中 Ⅰ 型前胶原 C 端肽结合固相抗体,酶标二抗与靶蛋白结合形成夹心复合物,洗板显色后通过标准曲线定量胶原合成标志物 CⅠCP。
产品参数:
产品名称 | 大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1319 |
英文名称 | CⅠCP ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.22ng/mL,适配胶原合成标志物检测
检测范围:0.45ng/mL - 45ng/mL
反应时间:总时长95分钟,样本孵育65分钟,二抗孵育30分钟
保存条件:2-8℃避光保存,抗体组分禁止冷冻
有效期:未开封原装6个月有效
显色系统:TMB双组分显色体系,显色稳定均匀
检测波长:450nm主波长检测
标准曲线绘制:6梯度标准品,四参数拟合,R²≥0.996
特异性:特异性识别CⅠCP,与其他前胶原末端肽无交叉反应
重复性:板内CV≤4.9%,板间CV≤6.9%
注意事项:样本避免溶血、脂血干扰;试剂平衡室温后混匀使用;终止后15分钟内完成读数
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂平衡:试剂室温静置 24min,洗涤液稀释 20 倍,纤维化组织匀浆上清备用。
标准品稀释:CⅠCP 标准品稀释配制 6 梯度溶液,设置空白调零孔。
加样孵育:50μL 标准品 / 样本 + 50μL 酶标抗体,封膜 37℃避光孵育 60min。
洗板操作:洗涤液浸泡 30s,拍干残液,洗板 5 次。
底物显色:底物 A、B 各 50μL,避光孵育 15min。
终止读数:终止液混匀,10min 内读取吸光度。
数据计算:定量 CⅠCP,评价胶原合成纤维化程度。
关键字: 大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽;CⅠCP;ELISA试剂盒;
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