大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒

双抗体夹心酶联免疫原理，微孔板预包被补体 BF 捕获抗体，样本中补体 B 因子结合固相载体，酶标记检测抗体结合靶蛋白，洗板显色后读取 OD 值，标准曲线定量体液内补体 BF 浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度可达0.1ng/mL，可精准检测样本中微量BF含量，无假阴性干扰

检测范围：0.2ng/mL - 80ng/mL，覆盖大鼠血清、组织匀浆、细胞上清液中BF常规表达浓度区间

反应时间：整体实验操作时长120分钟，包含样本孵育60分钟、酶标孵育30分钟、显色反应15分钟、终止稳定5分钟

保存条件：试剂盒未开封整体2 - 8℃冷藏保存，严禁冷冻；开封后板条密封避光2 - 8℃保存，试剂避免室温久置

有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月，严格按保存条件储存可稳定保质；开封后建议1个月内用完

显色系统：TMB单组分显色液显色，底物特异性结合酶标抗体，显色均匀稳定，无背景杂色

检测波长：酶标仪标准检测波长450nm，参考波长630nm，消除孔底反光、气泡干扰

标准曲线绘制：采用6点梯度标准品稀释浓度，以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，拟合四参数逻辑曲线，线性相关系数R²≥0.995

特异性：仅特异性识别大鼠B因子，与大鼠其他补体因子、同源蛋白无交叉反应，与小鼠、兔等异种物种蛋白无交叉结合

重复性：板内变异系数CV≤6%，板间变异系数CV≤8%，实验重复性良好，数据偏差可控

注意事项：实验所用枪头、离心管需无热源、无酶污染；样本需新鲜制备，避免反复冻融；显色过程严格避光，终止后15分钟内完成上机检测；严格把控孵育温度与时间，避免温育偏差影响结果
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

试剂平衡：试剂室温放置 25min，20× 洗涤液稀释，血清样本无溶血污染。

标准品稀释：BF 冻干标准品复溶梯度稀释 6 组浓度，空白调零孔。

加样孵育：50μL 标准品 / 样本 + 50μL 酶标记抗体，封膜 37℃避光孵育 60min。

洗板操作：洗涤液浸泡 30s，拍干，洗板 5 次。

底物显色：底物 A、B 各 50μL，避光孵育 15min。

终止读数：终止液混匀，10min 内读取吸光度。

数据计算：定量补体 B 因子，评价补体旁路激活水平。