本试剂盒采用双指标间接ELISA法原理，酶标板预先包被纯化的大鼠α-胞衬蛋白抗原，待测样本中的抗α-胞衬蛋白IgG、IgA抗体可特异性吸附于固相抗原上，洗涤去除未结合物质后，分别加入对应的HRP标记抗大鼠IgG、IgA二抗进行特异性结合，经底物显色、终止反应后测定吸光度，吸光度高低分别对应样本中两种抗体的含量，通过标准曲线即可分别计算出IgG、IgA亚型抗体的浓度。
基本参数：
产品名称：大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA试剂盒
英文名称：α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit
货号：Y-E1303
规格：48T/96T
灵敏度：IgG亚型≤0.08ng/mL，IgA亚型≤0.1ng/mL
检测范围：IgG：0.15ng/mL-12ng/mL；IgA：0.2ng/mL-10ng/mL
反应时间：总孵育反应150分钟，含样本结合、抗体孵育、显色全过程
保存条件：试剂盒整体2-8℃避光保存，标准品、酶结合物单独密封存放，防止挥发失效
有效期：未开封有效期6个月，开封后试剂1个月内用完
显色系统：双组分TMB显色系统，A、B液等比例混合使用，盐酸终止显色
检测波长：检测波长450nm，校准波长570nm
标准曲线绘制：双指标分别绘制标准曲线，四参数拟合，拟合度R²≥0.995
特异性：特异性结合大鼠α-胞衬蛋白IgG/IgA抗体，与其他胞浆蛋白抗体无交叉反应
重复性：板内变异系数≤8%，板间变异系数≤11%
注意事项：本试剂盒可同时检测两种亚型，样本避免反复冻融；显色过程严格避光，时间精准把控；不同批次试剂不可混用
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
提前 28min 拿出试剂盒组分室温放置，稀释浓缩洗涤液，配置好酶偶联工作液。
排布酶标板孔位，空白孔仅加稀释液，标准品、质控品、待测血清样本按规定稀释后加样，一并加入酶结合液。
封板封口，37℃恒温环境孵育 65min。
去除孔内反应液，洗板 6 次，每次浸泡 28s，倒扣板条吸干多余液体。
每孔加入显色 A、B 混合底物，避光孵育 18min 进行显色。
滴加终止液终止显色，充分混匀孔内体系。
酶标仪单波长 450nm 检测 OD 值，绘制标准曲线计算 IgG 与 IgA 抗体两项指标数值。
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