大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接ELISA检测原理，酶标板预先包被纯化的心磷脂抗原，待测样本中的大鼠抗心磷脂IgA抗体可与固相心磷脂抗原特异性结合，洗板去除未结合杂质后，加入HRP标记的抗大鼠IgA二抗孵育结合，经底物显色、终止反应后检测吸光度，吸光度值与样本中ACA-IgA抗体含量正相关，通过标准曲线精准定量目标抗体浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒

英文名称：ACA-IgA ELISA Kit
货号：Y-E1249

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.07ng/mL

检测范围：0.14ng/mL - 10ng/mL

反应时间：37℃恒温总反应150分钟

保存条件：2-8℃避光保存，抗体分型试剂单独存放

有效期：原装有效期12个月

显色系统：稳定TMB显色体系，终止后读数稳定

检测波长：450nm+570nm双波长校准

标准曲线绘制：四参数拟合标准曲线，精准适配IgA亚型检测

特异性：特异性识别大鼠心磷脂IgA抗体，不与IgG、IgM亚型交叉反应

重复性：板内CV≤6.8%，板间CV≤8.2%

注意事项：分型检测严格区分试剂，不可混用；样本无溶血、脂血干扰
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂室温回温 26min，稀释浓缩洗涤缓冲液，调配酶标记应用液。

标记各孔组别，空白孔加稀释液，标准品、对照、待测稀释样本与酶液同步加样。

封板 37℃孵育 62min。

洗板 5 次，浸泡 29s 每次，拍干板条。

显色底物避光显色 13min。

滴加终止液终止酶促反应。

酶标仪 450nm 检测吸光度，定量 ACA-IgA 抗体。
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