本试剂盒运用竞争性ELISA检测原理,将纯化的大鼠促甲状腺素受体抗原包被于酶标板,待测样本中的TRAb与固相抗原特异性结合,同时体系中加入定量酶标记TRAb竞争结合有限的固相抗原位点,孵育洗涤后加入底物显色,样本中TRAb含量越高,酶标记抗体结合量越少,显色越浅,吸光度值与样本TRAb浓度呈负相关,依托标准曲线可定量检测样本中抗促甲状腺素受体抗体含量。
基本参数:

产品名称:大鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒
英文名称:TRAb ELISA Kit
货号:Y-E1298
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.01IU/L
检测范围:0.02IU/L - 20IU/L
反应时间:室温孵育总时长180分钟,分阶段恒温反应
保存条件:2-8℃恒温避光保存,禁止冷冻,洗涤液、缓冲液室温保存即可
有效期:原装试剂盒有效期12个月
显色系统:高灵敏度TMB显色体系,避光反应,酸性终止液快速终止
检测波长:450nm主波长检测
标准曲线绘制:以国际标准单位浓度梯度建模,四参数拟合标准曲线
特异性:特异性识别大鼠促甲状腺素受体抗体,与甲状腺激素、其他受体抗体无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:血清样本需离心澄清,无浑浊;孵育温度恒定在25℃,温度波动影响检测结果;试剂使用前颠倒混匀
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒所有试剂室温平衡 25min,浓缩洗涤液用纯化水稀释配比待用。
标记酶标板各孔类型,空白孔无加样,标准品、阴阳性对照、待测样本稀释后上样,同步添加酶标记抗体试剂。
密封酶标板,37℃水浴孵育 55min。
倾倒弃净孔中液体,洗板 5 次,每次注满洗涤液静置 30s,拍干微孔水分。
加入显色底物混合液,避光 37℃显色 14min。
加入终止液终止酶促反应,轻微震荡酶标板混匀。
450nm 波长酶标仪读数,对照标准曲线计算 TRAb 抗体浓度。
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