大鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒

本试剂盒采用特异性双抗体夹心ELISA技术，酶标板固相包被可特异性结合大鼠甲状腺素抗体（TAb）的抗原蛋白，孵育时样本中的TAb可与固相抗原特异性结合。洗涤去除未结合物质后，加入HRP标记的特异性检测抗体，形成稳定免疫复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度。依据标准曲线换算，可精准定量大鼠样本中TAb的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤10IU/mL

检测范围：20IU/mL - 800IU/mL

反应时间：总反应时长120min（抗原抗体结合90min、显色30min）

保存条件：2-8℃冷藏避光，抗体试剂密封存放防失活

有效期：12个月（未开封）

显色系统：免疫检测专用TMB显色系统

检测波长：450nm

标准曲线绘制：梯度抗体标准品检测，四参数拟合定量曲线

特异性：特异性结合大鼠甲状腺素抗体，无其他自身抗体交叉反应

重复性：板内CV≤7%，板间CV≤9%

注意事项：样本避免污染，防止非特异性抗体干扰检测结果
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 35min，配制洗涤液，梯度稀释 TAb 标准品，取出酶标板条备用。

标品孔加不同浓度标准品 50μL，样本孔上样预处理样本 50μL，空白孔添加稀释缓冲液。

每孔加入酶标记抗体工作液 100μL，覆膜封板，37℃孵育 73min。

洗板 5 次，洗液浸泡 35s 每轮，弃液后吸水纸拍干微孔。

避光加显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 20min。

滴入终止液 50μL 终止酶促显色。

450nm 读取 OD 值，曲线计算 TAb 抗体含量。