本试剂盒基于间接酶联免疫吸附法原理，将大鼠单核细胞特异性抗原包被在酶标板微孔中，封闭空白位点后加入待测样本，样本内的抗单核细胞抗体可与固相抗原特异性结合，洗板除去游离杂质后，加入HRP标记的抗大鼠免疫球蛋白二抗孵育结合，底物催化显色后终止反应，检测吸光度值，其数值与样本中AMA含量正相关，通过标准曲线可实现样本抗体的定量检测。
基本参数：
产品名称：大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒
英文名称：AMA ELISA Kit
货号：Y-E1206
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度≤0.12ng/mL
检测范围：0.25ng/mL - 15ng/mL
反应时间：总反应时长130分钟，样本孵育70分钟，二抗孵育40分钟，显色20分钟
保存条件：试剂盒全部组分2-8℃避光冷藏，开封后密封防潮保存
有效期：未开封有效期8个月
显色系统：单组分稳定TMB显色液，无需现配，硫酸终止液终止
检测波长：450nm，参比波长600nm
标准曲线绘制：五梯度标准品浓度，四参数Logistic拟合，R²≥0.99
特异性：特异性结合大鼠单核细胞抗体，与淋巴细胞、粒细胞抗体无交叉反应
重复性：板内CV≤9%，板间CV≤10%
注意事项：避免样本中存在细胞杂质干扰结合反应；洗涤充分去除未结合杂质；显色超时会导致本底偏高
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 32min，稀释浓缩洗涤缓冲液，配制酶标工作液。
划分酶标板孔位，空白孔加入样本稀释液，标准品、对照、待测样本稀释后加孔，同时加入酶试剂。
封板膜密封，37℃恒温孵育 70min。
弃除孔内废液，洗板 5 次，每轮浸泡 35s，滤纸拍干板孔。
依次添加显色液 A、B，避光室温结合显色 16min。
加入终止液终止反应，混匀板内液体。
酶标仪 450nm 测吸光值，根据标准曲线定量样本 AMA 抗体水平。
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