大鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒

本试剂盒依托间接酶联免疫吸附试验原理，将大鼠红细胞特异性抗原包被于酶标板微孔，封闭非特异性位点后加入待测样本，样本中的抗红细胞抗体可与固相抗原特异性结合，洗涤后加入HRP标记二抗进行免疫结合，经底物显色、终止反应后检测吸光度，吸光度数值与样本中抗红细胞抗体含量呈正相关，通过标准曲线计算即可得到样本中目标抗体浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒

英文名称：Rat anti-red cell
货号：Y-E1013

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.15ng/mL

检测范围：0.3ng/mL - 18ng/mL

反应时间：总反应时长110分钟

保存条件：2-8℃冷藏避光保存，洗涤液室温保存，冬季防冻

有效期：未开封有效期6个月

显色系统：TMB底物显色，酸性终止液终止，显色稳定度高

检测波长：450nm+630nm双波长校准检测

标准曲线绘制：六梯度浓度标准品，四参数拟合，拟合系数≥0.994

特异性：特异性结合大鼠红细胞抗体，无血细胞同源蛋白交叉反应

重复性：板内CV≤8.5%，板间CV≤10.5%

注意事项：严禁溶血样本检测，会严重干扰实验结果；样本稀释比例精准，避免浓度偏差
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 26min，稀释洗涤液，调配酶标记应用液。

标记各孔组别，空白孔仅加稀释液，其余孔加入梯度标准品、对照及稀释待测样本，同步加酶液。

封板后 37℃孵育 62min。

洗板 6 次，每次浸泡 25s，倒出液体后拍干板条。

加入显色 AB 液，避光显色 13min。

滴加终止液终止酶反应，混匀体系。

酶标仪 450nm 检测吸光度，换算样本抗红细胞抗体浓度。
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