本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验原理，酶标板预先包被大鼠精子特异性抗原，封闭非特异性结合位点后加入待测样本，样本中的抗精子抗体可与固相抗原特异性免疫结合，洗涤后加入酶标记二抗孵育结合，底物显色终止后检测吸光度，吸光度数值随样本AsAb浓度升高而增加，结合标准曲线可实现样本抗精子抗体的定量检测。
基本参数：
产品名称：大鼠抗精子抗体(AsAb)ELISA试剂盒
英文名称：AsAb ELISA Kit
货号：Y-E1478
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度≤0.1ng/mL
检测范围：0.2ng/mL - 14ng/mL
反应时间：总反应时长125分钟
保存条件：2-8℃避光密封保存，开封组分分类存放，防止交叉污染
有效期：未开封有效期8个月
显色系统：稳定型TMB单组分显色系统
检测波长：450nm+630nm双波长检测
标准曲线绘制：四参数拟合，梯度浓度覆盖全检测区间
特异性：特异性结合大鼠抗精子抗体，与生殖系统其他抗体无交叉反应
重复性：板内CV≤8%，板间CV≤9.5%
注意事项：样本避免反复冻融，生殖样本需无菌处理；实验全程无外源蛋白污染
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 33min，配比稀释洗涤缓冲液，配制酶应用液。
区分各孔功能，空白孔无样本，标准梯度液、质控、待测稀释样本加孔，同步加入酶试剂。
封板 37℃孵育 66min。
洗板 6 次，每次浸泡 28s，拍干微孔。
显色底物避光反应 16min。
终止液终止反应并混匀。
酶标仪 450nm 测值，标准曲线计算 AsAb 抗体含量。
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