大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒

本试剂盒运用间接ELISA检测原理，将大鼠子宫内膜纯化抗原固定包被于酶标板微孔，待测样本中的抗子宫内膜抗体可与固相抗原特异性结合，洗去未结合杂质后，加入酶标记特异性二抗孵育结合，经显色、终止反应后检测吸光度，吸光度高低对应样本EMAb含量，结合标准曲线精准定量抗体水平。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒

英文名称：EMAb ELISA Kit
货号：Y-E1259

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.1ng/mL

检测范围：0.2ng/mL - 13ng/mL

反应时间：37℃恒温总反应125分钟

保存条件：2-8℃避光保存，生殖类试剂密封存放

有效期：未开封有效期8个月

显色系统：双组分TMB显色系统，避光反应

检测波长：450nm+570nm双波长检测

标准曲线绘制：四参数拟合，适配生殖抗体检测

特异性：特异性结合大鼠子宫内膜抗体，无生殖组织同源交叉反应

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤9.2%

注意事项：样本新鲜无腐败；试剂避免交叉污染，单独取用
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 33min，稀释浓缩洗涤液备用。

划分各孔用途，空白孔无样本加入，梯度标准品、阴阳性对照、待测稀释样本搭配酶结合物上样。

密封酶标板，37℃孵育 68min。

洗板 5 次，浸泡 33s 每次，滤纸拍干微孔液体。

显色液避光 37℃显色 16min。

滴加终止液终止显色并混匀。

450nm 读取吸光度，标准曲线测算 EMAb 抗体浓度。
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