本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法原理，预先将纯化的大鼠TRACP-5b特异性抗体包被于酶标板，加入待测样本后，样本中的TRACP-5b抗原可与固相捕获抗体特异性结合，洗去游离杂质后，加入酶标记检测抗体形成“捕获抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物，经底物显色、终止反应后测定吸光度，吸光度值与样本中TRACP-5b含量正相关，通过标准曲线精准定量样本抗原浓度。
基本参数：
产品名称：大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒
英文名称：TRACP-5b ELISA Kit
货号：Y-E1292
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度≤0.02U/L
检测范围：0.05U/L - 15U/L
反应时间：37℃恒温反应180分钟
保存条件：2-8℃避光保存，酶类试剂严禁冷冻，避免蛋白变性
有效期：原装有效期12个月
显色系统：高灵敏度酶促TMB显色系统
检测波长：450nm主波长检测
标准曲线绘制：酶活力单位梯度建模，四参数拟合，R²≥0.995
特异性：特异性识别大鼠TRACP-5b，不与其他酸性磷酸酶亚型交叉反应
重复性：板内CV≤5.5%，板间CV≤7%
注意事项：酶类样本需低温采集保存；避免高温、剧烈震荡导致酶失活
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
试剂室温放置 30min，稀释浓缩洗涤液备用。
酶标板设置空白、标准、对照、样本孔，依次加入稀释后样品与酶结合工作液。
覆膜密封，37℃温育 60min。
洗板 5 次，每孔浸泡 30s，弃液拍干。
加入显色 AB 液，避光显色 15min。
加入终止液终止酶促显色。
450nm 读取 OD 值，换算 TRACP-5b 蛋白浓度。
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