大鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接酶联免疫吸附法原理，固相酶标板包被心磷脂特异性抗原，待测样本中的大鼠抗心磷脂IgG抗体可与固相抗原发生特异性免疫结合，洗涤后加入酶标记抗大鼠IgG二抗，孵育结合后进行显色反应，终止后检测吸光度，吸光度数值与样本ACA-IgG抗体含量成正比，依托标准曲线完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒

英文名称：ACA-IgG ELISA Kit
货号：Y-E1247

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测灵敏度≤0.06ng/mL

检测范围：0.12ng/mL - 12ng/mL

反应时间：总反应时长145分钟

保存条件：2-8℃避光冷藏，密封防潮，防止试剂挥发

有效期：原装有效期12个月

显色系统：双组分TMB显色系统，反应均匀

检测波长：450nm检测波长

标准曲线绘制：六梯度浓度，四参数Logistic拟合

特异性：特异性结合大鼠心磷脂IgG抗体，亚型特异性强

重复性：板内CV≤6.5%，板间CV≤8%

注意事项：标准品精准稀释，避免浓度误差；孵育全程避光密封
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 32min，稀释洗涤浓缩液待用。

分孔设置空白、标准、阴阳性对照、待测样本孔，加入稀释后液体及酶结合试剂。

密封酶标板，37℃孵育 65min。

洗板 6 次，浸泡 30s / 次，彻底吸干洗液残留。

显色 AB 液避光反应 16min。

终止液混匀终止显色。

450nm 波长读数，换算 ACA-IgG 抗体浓度。
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