本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法原理,将大鼠抗胰蛋白酶(AT)特异性捕获抗体包被于酶标板微孔,加入待测样本后,样本中的AT抗原与固相捕获抗体特异性结合,洗涤后加入HRP标记的AT检测抗体,形成夹心免疫复合物,经显色、终止反应后测定吸光度,吸光度值与样本中AT含量呈正相关,通过标准曲线精准定量样本中抗胰蛋白酶含量。
基本参数:

产品名称:大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒
英文名称:AT ELISA Kit
货号:Y-E1203
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤0.04mg/L
检测范围:0.08mg/L - 20mg/L
反应时间:总反应时长130分钟
保存条件:2-8℃避光保存,蛋白酶试剂避免高温变性
有效期:原装有效期12个月
显色系统:优化酶促TMB显色体系
检测波长:450nm单一波长检测
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.995
特异性:特异性识别大鼠抗胰蛋白酶,与其他蛋白酶无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤7.8%
注意事项:样本采集后及时处理,避免蛋白酶降解;试剂严禁冷冻
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 28min,稀释洗涤浓缩缓冲液备用。
标记微孔功能,空白孔添加稀释液,标准品、质控、待测稀释样本搭配酶液加样。
封板后 37℃孵育 63min。
洗板 5 次,浸泡 28s 每次,倒扣拍干微孔。
底物避光显色 14min。
终止液终止反应并震荡混匀。
酶标仪 450nm 读数,标准曲线计算 AT 蛋白浓度。
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