本试剂盒采用广谱特异性双抗体夹心ELISA技术,酶标板包被大鼠BMPs家族通用特异性抗体,样本中的骨形成蛋白抗原与包被抗体特异性结合,结合酶标记检测抗体后显色,吸光度与样本BMPs总含量正相关,通过标准曲线完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1146 |
英文名称 | BMPs ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤15pg/mL
检测范围:30pg/mL - 1100pg/mL
反应时间:总反应时长140分钟(样本温育80分钟、酶温育30分钟、显色30分钟)
保存条件:2-8℃避光保存,浓缩试剂使用前稀释混匀
有效期:未开封有效期6个月,开封后1.5个月内使用
显色系统:HRP-TMB显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.990
特异性:广谱特异性识别大鼠骨形成蛋白家族核心靶点,无无关蛋白交叉反应
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%
注意事项:样本无蛋白变性、无杂质;温育全程密封避光,保证反应充分
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂室温回温 37min,稀释总 BMPs 混合标准品建立梯度浓度,对酶标板孔位分类编号。
一步上样:标准孔加梯度标准液 100μL,待测孔加入大鼠成骨细胞培养液 100μL,空白孔补稀释液。
封板密闭,37℃恒温孵育 84min,广谱结合样本内各类骨形成蛋白。
弃去孔内液体,洗涤液浸泡每孔 41s,连续洗板 6 次,去除非特异吸附物。
检测孔加入广谱酶标抗体工作液 100μL,避光 37℃孵育 37min。
依次添加显色 A、B 液各 50μL,混匀避光显色 19min。
终止液终止显色,酶标仪 450nm 读数,绘制曲线计算总 BMPs 含量。
关键字: 大鼠骨形成蛋白;BMPs;ELISA试剂盒;
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